欧阳凤菊，李兆利，赫明雷，刘慧芳，司 微，刘思国*，王春来，倪洪波，王 宇，曲娟娟*

(1.东北农业大学资源与环境学院，黑龙江 哈尔滨 150030；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001)

细菌生物被膜(Bacterial biofilm，BF)是细菌为适应自然环境，吸附于生物材料或机体腔道表面，分泌多糖基质、纤维蛋白、脂质蛋白等，将自身包绕而形成的大量细菌聚集膜样物[1]，由此引起的相关感染性疾病及慢性感染的反复发作称为细菌BF病，又称菌膜病[2-3]。禽大肠杆菌(E.coli)感染是造成禽类胚胎和雏鸡死亡的重要原因，可引起禽类急性败血症、关节炎、卵黄性腹膜炎、输卵管炎、肺炎等一系列疾病[4]。当家禽感染禽致病性E.coli后，由于抗生药物的不合理使用，继而发展成为禽致病性E.coli BF病，不仅造成严重的经济损失，而且作为一种常见的人兽共患病，致病性E.coli通过食物链侵袭摄入者同时在体内形成生物被膜病，对人类健康同样有着极大的威胁。

菌种类型、接入菌量、载体类型、营养条件和外界环境[5-7]诸多因素都影响BF的形成。观察禽致病性E.coliBF的形成周期，了解不同条件下BF中细菌粘附载体的程度，为进一步明确BF的形成机制提供了实验依据，对抑制禽致病性E.coliBF形成具有指导意义。

1 材料和方法

1.1 实验材料 菌种为一株野生禽致病性E.coli，由哈尔滨兽医研究所细菌室分离鉴定保存；生物培养膜片、平底24孔细胞培养板、U底96孔细胞培养板均为Corning Costar产品、一次性血凝板、Maconkey培养基、LB培养基、M63培养基[8]、5%TSB培养基[9]均为BD Falcon产品；……