欧阳雁， 冯文化

(中国医学科学院 北京协和医科大学 药物研究所，北京 100050)

万古霉素目前临床上主要适用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其他细菌所致的感染，由于其耐药的革兰性阳性菌的出现，不得不开发万古霉素或其它糖肽抗生素的半合成衍生物。盐酸特拉万星【Telavancin， {Nvan-2-(癸基氨基)乙基-29-[(N-膦酰基甲基)氨甲基]万古霉素(Ⅰ)}】正是在此背景下开发成功并获得FDA批准的第一个万古霉素衍生物。Ⅰ为万古霉素的半合成衍生物,化学结构上在万古糖胺部份连接一个疏水性侧链,然后和氨甲基膦酸通过曼尼希反应在七位氨基酸的邻苯二酚部位引入膦酰甲基氨甲基[1]。

Chart1

本课题组[2]已成功合成了Ⅰ。本文参照其结构，以万古霉素盐酸盐(1， Chart 1)为原料，将其万古糖胺部位与异腈酸酯反应生成新型的万古霉素衍生物(3a～3m)；在其邻苯二酚位上，3与氨甲基膦酸进行曼尼希反应，合成了一系列新型的N-胺基羰酰取代的万古霉素衍生物(4a～4m， Scheme 1)，其结构经1H NMR，31P NMR和ESI-MS表征。

13a～3m4a～4m

CompabcdefgR1()2-()3-()4-()6-C6H5-naphthyl4-ClC6H4-ComphijklmR14-BrC6H4-4-FC6H4-4-MeOC6H4-4-EtC6H4-4-CF3Bn3,5-Cl2C6H3-

Scheme1

1 实验部分

1．1 仪器与试剂

Varian 500 MHz型核磁共振仪(DMSO-d6为溶剂，TMS为内标)；Agilent LC/MSD TOF型质谱仪；Alltech型高效液相色谱仪[HPLC,色谱柱：Krosmail C18柱(4.6 nm×150 mm, 5μm)；流动相：A=V(水) ∶V(乙腈) ∶V(TFA)=98 ∶2 ∶0.1%, B=V(水) ∶V(乙腈) ∶V(TFA)=10 ∶90 ∶0.1%；梯度洗脱：A ∶B=95 ∶5～60 ∶40洗脱0 min～20min, A ∶B=60 ∶40洗脱20 min～40min；流速: 1.0 min·min-1；检测波长：280 nm。半制备色谱柱[Shim-pack PRC-ODS(H)(250 nm×20 mm);流速：5.0 mL·min-1；梯度洗脱：A ∶B=95 ∶5～60 ∶40洗脱0 min～30min, A ∶B=60 ∶40洗脱30 min～60 min;检测波长：280 nm]。

1，纯度>93%，华北制药厂；2a～2m，百灵威；乙腈，色谱纯；其余所用试剂均为化学纯。

1．2 合成

(1)3a～3m的合成(以3b为例)

在反应瓶中加入1 2 g(1.35 mmol),混合溶剂[V(DMSO) ∶V(水)=4 ∶1] 15 mL及吡啶20 mL，搅拌10 min,加入己基异腈酸酯(2a)257 mg(2.02 mmol),于室温反应至终点(HPLC监测)。加丙酮100 mL，析出白色固体，减压抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，干燥得白色固体3b1.79 g,纯度97.1%(直接用于下一步反应)；ESI-MSm/z: 789.2{[M+2]2+}。

用类似的方法合成3a,3c～3m。

(1) 4a～4m的合成(以4b为例)

在反应瓶中加入3b0.5 g(0.32 mmol),氨甲基膦酸70 mg(0.63 mmol)的乙腈(3 mL)溶液及水2 mL，搅拌均匀后用3 mol·L-1NaOH溶液调至pH 9～10(溶液变澄清),于室温搅拌10 min，加入多聚甲醛9.99 mg(0.33 mmol),反应至终点(HPLC监测)。加丙酮100 mL，析出白色固体，用反相制备色谱纯化得白色固体4b232 mg，总收率36.3%,纯度95.2%;1H NMRδ: 2.67(s, 2H, CH2), 1.26～1.23(m, 9H, CH2), 0.92～0.69(m, 9H, CH3)；31P NMRδ: 11.28。

用类似的方法合成4a, 4c～4m，实验结果见表1。

表1 4的实验结果Table 1 Experimental results of 4

2 结果与讨论

本文以1为原料，合成了一系列N-胺基羰酰取代的新型万古霉素衍生物，除3e外，其余(3a～3d,3f～3m以及4a～4m)均为新化合物。该方法简便、高效，且收率稳定。

对3g进行MS-MS分析，除了准分子离子峰1 602{M+H]+}外，而且还给出了丰富的碎片信息峰。其中碎片离子峰297.1和1 307.3表明1与2是在万古糖胺部位反应，而不是亮氨酸部位发生反应[3]。同时，相对于1，1H NMR分析表明，6.25处间苯二酚位芳香质子吸收峰消失，表明该部位质子被取代；2.67处的单峰为膦酰甲基的CH2质子吸收峰，而在1.23～1.26的吸收峰为己基的CH2质子吸收峰；31P NMR中11.28的吸收峰为P(=O)(OH)2中磷原子的吸收峰。

[1] 马培奇. 新型脂糖肽类抗生素特拉万素[J].上海医药，2010,31(3)：124-125.

[2] 梁玉华，冯文化. 脂糖肽抗生素Telavancin的合成工艺改进[J].合成化学，2011,19(4)：550-553.

[3] Nagarajan R, Schabel A A, Occolowitz J L,etal. Synthesis and antibacterial activity ofN-acyl vancomycins[J].The Journal of Antibiotics,1988,41(10):1430-1438.

[4] Eli Lilly， Company. Urea and thiourea derivatives of glycopeptides[P].EP 881 230 A2,1998.

[5] Schmidt Donald E, Sganga Jeanmarie Donovan. Process for purifying glycopeptides phosph onate derivatives[P].US 119 722 A1,2003.