周 阳,尹 星,付 民,常 欢,邢艳丽,李毅星,尹先哲

河南省南阳市第二人民医院肿瘤科,河南南阳 473000

肝癌是目前临床上较为常见的恶性肿瘤,我国肝癌在所有癌症疾病中的病死率高居第2位,发病率则高居第4位,男性群体肝癌发病率及病死率均高于女性群体[1-3]。相关研究报道指出,肝癌疾病的发生发展与其是否感染乙型肝炎(简称乙肝)病毒或丙型肝炎病毒具有密切关系,大多数确诊的患者均为乙肝相关肝癌,乙肝相关肝癌也受到国内外医学专家的重视[4]。目前治疗乙肝相关肝癌的方法多为肝动脉化疗栓塞术(TACE),能够在一定程度上延长患者的生存时间,尤其是对于中晚期肝癌患者,但仍有部分患者术后发生复发转移,预后较差。目前临床上对乙肝相关肝癌患者预后的评估多以影像学检查联合血清甲胎蛋白(AFP)检测为主,但用AFP评估患者预后的灵敏度较低[5]。因此,积极探索较高特异度和灵敏度的血清肿瘤标志物对于改善乙肝相关性肝癌患者的预后评估具有重要意义。已有临床研究结果表明,血清中癌基因[增殖相关基因(C-myc)、转化基因(N-ras)、丝/苏氨酸激酶1(PLK1)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)]蛋白水平在肝癌患者中异常升高,提示血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平可能参与肝癌疾病的发生、发展[6]。基于此,本研究对127例乙肝相关肝癌患者的临床资料进行分析,旨在探讨乙肝相关肝癌患者TACE术前血清中癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平对其TACE术后预后的评估价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院于2016年7月至2021年1月收治的乙肝相关肝癌患者127例作为研究对象。年龄37～78岁,平均(61.62±9.53)岁,男75例,女52例;TNM分期Ⅰ期28例,Ⅱ期22例,Ⅲ期43例,Ⅳ期34例。纳入标准:(1)符合乙肝相关肝癌的诊断标准[7];(2)年龄≥18岁;(3)均为无法接受外科根治性手术而选择TACE治疗;(4)肝脏储备功能:Child-Pugh分级为A级或B级。排除标准:(1)合并恶性肿瘤;(2)存在TACE禁忌证;(3)合并严重腹水;(4)妊娠或哺乳期;(5)存在严重凝血功能障碍;(6)临床资料缺失;(7)随访途中退出本研究。研究对象均志愿参加且知情同意本研究,符合《赫尔辛基宣言》的伦理学准则,本研究通过本院医学伦理委员会审批。

1.2方法

1.2.1TACE治疗方法 使用赛丁格(Seldinger)法经皮穿刺,利用短导丝置入导管鞘,在X线引导下,将导管选择性插入乙肝相关肝癌患者的肿瘤供血动脉后进行造影。以明确肿瘤周围血管分布及肿瘤的位置、数目、大小,将化疗药物(奥沙利铂60 mg/m2及氟尿嘧啶750 mg/m2)稀释液及40%碘化油(15～25 mL)缓慢注入至肿瘤的主要供血动脉内,然后使用明胶海绵颗粒栓塞完成栓塞以尽可能阻断患者的肿瘤血供。

1.2.2临床资料收集 对127例乙肝相关肝癌患者TACE术前的临床资料进行收集,包括年龄、性别、体重指数(BMI)、TNM分期、有无高血压史、有无糖尿病史、有无吸烟史、有无饮酒史、肿瘤最大径、肿瘤数目、有无门静脉转移、有无腹腔转移、介入治疗次数和Child-Pugh分级;以及血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平(采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定),仪器采用Epoch2型酶标仪(美国Biotek公司),试剂盒购自北京鼎国生物有限公司。

1.3随访记录 采用门诊、电话、微信等方法对乙肝相关肝癌患者进行随访,随访截止时间为2022年8月。以乙肝相关肝癌患者首次接受TACE治疗后为研究起点,患者死亡或随访截止为研究终点。记录乙肝相关肝癌患者在随访期间的总生存情况,且根据乙肝相关肝癌患者的生存结局将其分为死亡组及存活组。

2 结 果

2.1影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的单因素分析 随访期间,乙肝相关肝癌患者TACE术后死亡59例,病死率为46.46%。单因素分析结果显示,TNM分期、糖尿病史、饮酒史、门静脉转移、腹腔转移、Child-Pugh分级及血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均是影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的相关危险因素(均P<0.05)。见表1。

表1 影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的单因素分析

2.2影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的多因素Cox回归分析 乙肝相关肝癌患者TACE术后生存情况为因变量,将影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的相关危险因素(TNM分期、糖尿病史、饮酒史、门静脉转移、腹腔转移、Child-Pugh分级及血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平)为自变量,对乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的多因素Cox回归分析,变量具体赋值为;生存情况(存活=0,死亡=1)、TNM分期(Ⅰ～Ⅱ期=0,Ⅲ～Ⅳ期=1)、糖尿病史(无=0,有=1)、饮酒史(无=0,有=1)、门静脉转移(无=0,有=1)、腹腔转移(无=0,有=1)、Child-Pugh分级(A级=0,B级=1)、血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均为实测值。

多因素Cox回归分析结果提示,TNM分期Ⅲ～Ⅳ期(HR=2.998,95%CI:1.239～7.257)、有门静脉转移(HR=3.737,95%CI:1.941～7.193)、有腹腔转移(HR=3.482,95%CI:1.709～7.097)、Child-Pugh分级B级(HR=2.587,95%CI:1.045～6.406)、高血清癌基因C-myc蛋白水平(HR=1.224,95%CI:1.090～1.374)、高血清癌基因N-ras蛋白水平(HR=1.218,95%CI:1.097～1.353)、高血清癌基因PLK1蛋白水平(HR=1.237,95%CI:1.110～1.379)、高血清癌基因FGF2蛋白水平(HR=1.141,95%CI:1.060～1.228)均是影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的独立危险因素(均P<0.05)。见表2。

表2 影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的多因素Cox回归分析

2.3血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平对乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的预测价值 血清癌基因PLK1蛋白水平对乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的预测价值较高(AUC=0.906,95%CI:0.854～0.958),血清癌基因N-ras蛋白水平对乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的预测价值较低(AUC=0.777,95%CI:0.697～0.856)。见表3、图1。

图1 血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平对乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的ROC曲线

表3 不同血清癌基因蛋白对乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的预测价值

2.4血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平与乙肝相关肝癌患者TACE术后预后生存的关系 以ROC曲线结果中的截断值为截点,将血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平分为高表达组(C-myc>17.260 pg/mL、N-ras>18.375 pg/mL、PLK1>13.970 pg/mL、FGF2>20.675 pg/mL)和低表达组(C-myc≤17.260 pg/mL、N-ras≤18.375 pg/mL、PLK1≤13.970 pg/mL、FGF2≤20.675 pg/mL)。血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平低表达组的总生存率均明显高于血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平高表达组,差异有统计学意义(均P<0.001)。见图2。

注:A为血清癌基因C-myc蛋白水平与乙肝相关肝癌患者TACE术后预后生存的关系;B为血清癌基因N-ras蛋白水平与乙肝相关肝癌患者TACE术后预后生存的关系;C为血清癌基因PLK1蛋白水平与乙肝相关肝癌患者TACE术后预后生存的关系;D为血清癌基因FGF2蛋白水平与乙肝相关肝癌患者TACE术后预后生存的关系。

3 讨 论

肝癌是全球每年超过50万人的死亡原因,我国每年新发确诊的肝癌患者约占全世界的50%[8-9]。对于无法外科治疗的肝癌患者,TACE已成为首选治疗方案,将化疗药物混合在碘油中,使肿瘤细胞与化疗药物之间的靶向接触时间得以延长以提升疗效,且不良反应少[10-11]。AFP在肝癌患者预后评估中具有重要意义,但相关研究指出,我国约有40%的原发性肝癌患者AFP检测结果为阴性,TACE术后预后评估有待提升[12]。近年研究表明,当肝癌患者癌基因及抑癌基因抑制或活化发生异常时,会导致组织细胞增殖不受控制演变为肿瘤[13]。因此,本研究探索血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平与乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的关系。

本研究单因素及多因素Cox回归分析结果提示,高血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均是影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的独立危险因素(均P<0.05)。血清癌基因C-myc蛋白是肝癌细胞重要的癌基因之一,血清癌基因C-myc蛋白信号可显著抑制肝癌细胞铁死亡过程[14-15]。姬媛媛等[16]指出,血清癌基因N-ras蛋白主要是借助G蛋白偶联受体信号分子传导路径来发挥自身的生物学效应,血清癌基因N-ras水平的高表达可为癌变的肿瘤细胞提供较为舒适的生长环境,其异常表达被视作是肝癌患者体内病灶发生恶性转化的较早分子水平转变,血清癌基因N-ras水平的高表达往往预示着肿瘤的恶性分化程度较强。近年也有研究报道指出,PLK1具有阻碍细胞凋亡方面、诱导DNA完整性的检修及DNA合成的作用[17-18]。陈虹瑛等[19]指出,在正常肝脏中PLK1多为不表达或低表达,而在46%的肝癌中呈现高表达,提示高血清癌基因PLK1蛋白水平的乙肝相关肝癌患者的TACE术后预后较差,可能是对患者体内组织细胞的有丝分裂过程进行调控,使患者体内恶性肿瘤细胞得到进一步发展。JIMENEZ-PASCUAL等[20]指出,作为肿瘤生长促进因子一员中的血清癌基因FGF2可在多种恶性肿瘤组织中呈现高表达状态。陈昶舟等[21]研究结果表明,通过对肝癌患者细胞系中的血清癌基因FGF2 mRNA转录过程进行抑制,可显著改善肝癌患者的预后。这可能是血清癌基因FGF2参与患者体内组织细胞的有丝分裂和肿瘤细胞血管生成过程,从而影响细胞分化和基因表达,使机体组织稳态受到破坏,促进肿瘤细胞的生长、侵袭[22]。本研究的多因素Cox回归分析结果也表示,TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有门静脉转移、有腹腔转移及Child-Pugh分级B级均独立影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后情况(均P<0.05),与既往研究结果类似[23-24]。

综上所述,高血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均是影响乙肝相关肝癌患者TACE术后预后的独立危险因素,对乙肝相关肝癌患者预后生存分析具有一定的预测价值。