张玉杰,李佳慧,司宇光

北京市怀柔区中医医院:1.耳鼻喉科;2普外科,北京 101400

变应性鼻炎是一种慢性炎症性免疫球蛋白E(IgE)介导的鼻黏膜疾病,由吸入季节性或常年过敏原引发,其典型症状包括打喷嚏、鼻漏、鼻痒、鼻塞和过敏性结膜炎症状等,且患病率不断增加[1-2]。虽然变应性鼻炎本身并不危及患者生命,但会影响患者睡眠,造成其学习困难、工作表现和社会功能受损[3]。迄今为止,尚无用于监测变应性鼻炎患者的高效生物标志物,需要进行进一步的研究来识别和确认新生物标志物,以对变应性鼻炎患者进行更加准确的临床诊断。CXC趋化因子配体16(CXCL16)属于趋化因子α亚科,其N末端具有CXC基序,其在天然免疫屏障和自身免疫性疾病的发生和发展中都起着重要作用[4-5]。抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)是一组针对人中性粒细胞和单核细胞内细胞质抗原的自身抗体,主要在血管炎和炎症性疾病患者中检测[6]。ANCA与ANCA相关性血管炎、肾小球肾炎的发生发展密切相关,但目前鲜见其在变应性鼻炎相关疾病中的报道。本研究通过测定变应性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平,分析二者在变应性鼻炎中的临床诊断价值,为变应性鼻炎的诊疗提供一定依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2022年1-12月在本院就诊治疗的变应性鼻炎患者84例(变应性鼻炎组)作为研究对象,其中男46例、女38例,年龄21～63岁,平均(43.15±12.07)岁。另选取同期在本院体检的健康者80例作为对照组,其中男40例、女40例,年龄20～64岁,平均(42.56±11.85)岁。纳入标准:(1)变应性鼻炎组均经临床诊断确诊为变应性鼻炎患者[7];(2)所有研究对象均无认知障碍和交流障碍。排除标准:(1)恶性肿瘤、严重心血管及其他内脏疾病;(2)患有特异性皮炎及其他过敏性疾病;(3)严重传染性疾病或感染性疾病;(4)研究前30 d内具有镇静剂、抗组胺药、免疫抑制剂、糖皮质激素等相关药物治疗史。本研究经医院伦理委员会审查批准,所有研究对象均知情且同意。

1.2仪器与试剂 EnVision多功能酶标仪(美国PerkinElmer公司)、BS-600M全自动生化分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司);KUBOTAKA-2200离心机(日本久保田公司)。人CXCL16酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(上海酶研生物科技有限公司)、人ANCA ELISA试剂盒(江西艾博因生物科技有限公司)。

1.3方法

1.3.1临床资料收集 收集所有研究对象的性别、年龄,以及采用全自动生化分析仪检测炎症因子[白细胞介素(IL)-4、IL-9、IL-13]和IgE水平的临床资料。

1.3.2ELISA测定血清CXCL16、ANCA水平 采集变应性鼻炎患者就诊当日和对照组体检当日清晨空腹静脉血3 mL,4 ℃冰箱保存,离心机5 000 r/min离心8 min,取上清液,-70 ℃冰箱低温保存备用。根据人CXCL16 ELISA试剂盒、人ANCA ELISA试剂盒说明书配制CXCL16、ANCA标准品溶液,解冻血清样本,多功能酶标仪测定CXCL16、ANCA标准品溶液及血清样本在450 nm处的吸光度,绘制CXCL16、ANCA标准品回归曲线。根据CXCL16、ANCA标准品回归曲线方程,计算血清CXCL16、ANCA水平。

1.3.3变应性鼻炎病情程度评估 根据文献[7]将变应性鼻炎患者分为轻度组44例和中重度组40例。轻度变应性鼻炎:临床症状较轻,未对患者工作、学习、睡眠及生活造成显著影响;中重度变应性鼻炎:临床症状显著或严重,严重影响患者日常工作和生活。

2 结 果

2.1变应性鼻炎组与对照组临床资料比较 与对照组比较,变应性鼻炎组IL-4、IL-9、IL-13和IgE水平均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);两组性别和年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 变应性鼻炎组与对照组临床资料比较

2.2变应性鼻炎组与对照组血清CXCL16、ANCA水平比较 与对照组比较,变应性鼻炎组血清CXCL16和ANCA水平均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 变应性鼻炎组与对照组血清CXCL16、ANCA水平比较

2.3血清CXCL16、ANCA水平在诊断变应性鼻炎中的价值 以血清CXCL16、ANCA水平为检验变量,以研究对象是否为变应性鼻炎患者为状态变量(是=1,否=0)绘制ROC曲线。ROC曲线分析结果显示:血清CXCL16水平诊断研究对象为变应性鼻炎患者的曲线下面积(AUC)为0.897(95%CI:0.848～0.946),截断值为3.19 ng/L,特异度为90.00%,灵敏度为76.19%;血清ANCA水平诊断研究对象为变应性鼻炎患者的AUC为0.844(95%CI:0.785～0.903),截断值为127.63 ng/mL,特异度为83.75%,灵敏度为72.62%。血清CXCL16、ANCA联合诊断研究对象是否为变应性鼻炎患者的AUC为0.959(95%CI:0.931～0.986),均优于各自单独诊断(Z=2.164、3.474,P<0.05),特异度为93.75%,灵敏度为89.29%。见图1。

图1 血清CXCL16、ANCA水平诊断变应性鼻炎患者的ROC曲线

2.4不同严重程度变应性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平比较 变应性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平均随患者病情严重程度加重而升高(P<0.05)。见表3。

表3 不同严重程度变应性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平比较

2.5变应性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平与炎症因子及IgE相关性分析 Pearson相关分析结果显示,变应性鼻炎患者血清CXCL16水平与IL-4、IL-9、IL-13及IgE均呈正相关(r=0.507、0.496、0.542、0.528,P<0.05);变应性鼻炎患者血清ANCA水平与IL-4、IL-9、IL-13及IgE也均呈正相关(r=0.511、0.504、0.535、0.519,P<0.05)。

2.6血清CXCL16、ANCA水平在诊断中重度变应性鼻炎中的价值 以血清CXCL16、ANCA水平为检验变量,以变应性鼻炎患者是否为中重度变应性鼻炎患者为状态变量(是=1,否=0)绘制ROC曲线。ROC曲线分析结果显示:血清CXCL16水平诊断变应性鼻炎患者为中重度变应性鼻炎患者的AUC为0.862(95%CI:0.786～0.937),截断值为3.67 ng/L,特异度为88.64%,灵敏度为70.00%;血清ANCA水平诊断变应性鼻炎患者为中重度变应性鼻炎患者的AUC为0.832(95%CI:0.746～0.918),截断值为163.33 ng/mL,特异度为62.50%,灵敏度为95.45%。血清CXCL16、ANCA联合诊断变应性鼻炎患者是否为中重度变应性鼻炎患者的AUC为0.949(95%CI:0.905～0.992),均优于各自单独诊断(Z=1.981、2.378,P<0.05),特异度为90.91%,灵敏度为90.00%。见图2。

图2 血清CXCL16、ANCA诊断中重度变应性鼻炎的ROC曲线

3 讨 论

变应性鼻炎是由致敏个体暴露于常见吸入性变应原时由Ⅰ型变应反应诱发的疾病,由于炎症因子促进Ⅰ型变应反应的发生发展,因此炎症因子也与变应性鼻炎的发生密切相关[8]。变应性鼻炎患者鼻上皮屏障受损和变应原暴露可能在这种疾病中起主要作用,变应性鼻炎患者上皮屏障受损,给变应原侵入造成了有利条件,导致变应性鼻炎的易发性[9-10]。NUR HUSNA 等[11]和邓小刚等[12]研究显示,变应性鼻炎患者血清IL-4、IL-9、IL-13、IL-17及IgE水平均显著升高,且血清IgE和IL-4、IL-17均呈正相关。有研究显示,IL-4/IL-13轴在变应性鼻炎和哮喘的发病机制中发挥重要作用,通过抗IL-4Rα单克隆抗体治疗可成功恢复变应性鼻炎患者上皮屏障的完整性和功能,且IL-4和IL-13可通过激活IL-4Rα/STAT6途径诱导变应反应[13-15]。本研究结果发现,与对照组比较,变应性鼻炎组IL-4、IL-9、IL-13和IgE水平均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),与以上研究结果相似[13-15]。该作用途径可能是在外界变应原作用下,人体IgE水平上调,高水平IgE诱导Th细胞向Th2方向不断分化,Th2细胞通过释放IL-4、IL-9等相关炎症因子,诱导变应性鼻炎发生[11]。

CXCL16是一种由炎症细胞产生的趋化因子,包括长度分别为1.8 kb和2.5 kb的两个转录本,其基因位于染色体17p13,与其他趋化因子的同源性较差[16]。CXCL16是一种化学引诱剂,可介导表达CXCR6的免疫细胞的募集进而诱发炎症[5]。研究显示,CXCL16在类风湿性关节炎、炎症性肠病、痛风病等炎症过程以及多种肿瘤疾病中起重要作用,其水平均呈升高趋势[17-18]。本研究结果发现,与对照组比较,变应性鼻炎组血清CXCL16水平均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),血清CXCL16水平诊断变应性鼻炎的AUC为0.897,且CXCL16水平随病情的加重而升高,与同家族的CXCR4在变应性鼻炎中的研究结果相似[10],提示血清CXCL16水平在诊断变应性鼻炎疾病中具有一定价值。ZHENG等[10]研究显示,CXCR4通过miR-125b/FoxP3轴调节变应性鼻炎中的上皮屏障功能影响进而变应性鼻炎的进展。本研究结果显示,变应性鼻炎患者血清CXCL16水平与IL-4、IL-9、IL-13及IgE均呈正相关(r=0.507、0.496、0.542、0.528,P<0.05),提示血清CXCL16水平与变应性鼻炎的炎症反应密切相关。进一步研究发现,血清CXCL16诊断中重度变应性鼻炎患者的AUC为0.862,特异度为88.64%,提示CXCL16对中重度变应性鼻炎具有一定的诊断价值。

ANCA是以单核细胞和中性粒细胞胞质为靶抗原的内源性抗体,其主要靶抗原是蛋白酶3和髓过氧化物酶,在多种疾病的发生发展中起到关键作用[19-20]。有研究显示,ANCA在血管炎合并慢性鼻窦炎病例中具有较高的阳性率,检测ANCA水平能够对该疾病进行早期确诊[21]。在闭塞性细支气管炎患者中发现,ANCA随其病情严重程度的减轻而下降,对其病情评估具有一定临床意义[22]。本研究结果发现,与对照组比较,变应性鼻炎组血清ANCA水平均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),血清ANCA水平诊断变应性鼻炎的AUC为0.844,且随病情的加重而升高,与陈晓雯等[22]在闭塞性细支气管炎中的研究结果相似,提示血清ANCA水平对变应性鼻炎的诊断具有一定价值。本研究结果显示,血清CXCL16、ANCA联合诊断变应性鼻炎的AUC为0.959,均优于各自单独诊断,推测血清CXCL16、ANCA联合在诊断变应性鼻炎疾病的发生中具有重要价值。本研究结果显示,变应性鼻炎患者血清ANCA水平与IL-4、IL-9、IL-13及IgE也均呈正相关(r=0.511、0.504、0.535、0.519,P<0.05),血清ANCA诊断中重度变应性鼻炎患者的AUC为0.832,灵敏度为95.45%。提示ANCA在诊断中重度变应性鼻炎中具有一定价值。进一步研究发现,血清CXCL16、ANCA联合诊断中重度变应性鼻炎患者的AUC为0.949,均优于各自单独预测,特异度为90.91%,灵敏度为90.00%,二者联合有望成为临床诊断变应性鼻炎病情的有效指标。

综上所述,变应性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平均显著上升,且随患者病情加重而升高,二者在临床诊断变应性鼻炎病情中具有一定潜在价值。本研究样本数量有限,需要扩大样本,进一步地验证,并深入探究二者在变应性鼻炎中的具体作用机制。