猪流行性腹泻病毒SCYA2204 株的基因克隆及测序分析
2024-01-21孔晶晶田珺劼任玉鹏陈弟诗
孔晶晶,田珺劼,任玉鹏*,陈弟诗,包 昕
(1.西南民族大学畜牧兽医学院,四川 成都 610041;2.四川省动物疫病预防控制中心,四川 成都 610041)
猪流行性腹泻(PED)由冠状病毒科Alpha 冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起,PEDV 对各日龄猪都具有易感性,对2 周龄内仔猪的致死率可达100%[1]。PEDV 为单股正链RNA 病毒,全基因组序列大小约为28 kb,包含5′端帽子结构,3′端poly(A)尾及7 个开放阅读框(ORF),共编码纤突蛋白(S蛋白)、包膜蛋白(E蛋白)、膜蛋白(M蛋白)和核衣壳蛋白(N蛋白)等四种结构蛋白,以及ORF1ab 复制酶多聚蛋白和ORF3蛋白等非结构蛋白[2]。S蛋白是PEDV重要的毒力蛋白,它所构建的系统进化树可将PEDV划分为G1和G2两个型,其中G2型包含G2a、G2b和G2c 亚型[3],我国目前流行的毒株主要是G2a、G2b 亚型。监测S 基因的遗传变异对PED 的防控施策具有重要意义[4]。此外,PEDV的ORF3蛋白是唯一的非结构辅助蛋白。在PEDV连续传代弱化毒株中,ORF3 基因存在17 个连续氨基酸的稳定缺失,可能与其毒力弱化有关[5]。E 蛋白主要调控病毒组装、胞内运输和病毒释放等过程,还能引起内质网产生应激,并促使宿主细胞产生白细胞介素-8(IL-8)、B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2),造成细胞损伤和诱导细胞凋亡[6]。M 蛋白位于整个细胞质中,通过与S 蛋白和N 蛋白相互作用在病毒核衣壳的组装过程中发挥重要作用,对细胞增殖和病毒复制具有重要影响。N蛋白是一种高度保守的磷蛋白[7],是PEDV核衣壳的基础结构,在病毒复制、组装过程中发挥重要作用。
本研究对四川省雅安地区流行的一株PEDV SCYA2204的S基因、ORF3基因、E基因、M基因和N基因进行基因克隆及测序,分析病毒基因核苷酸序列,并推导氨基酸序列的变异性及遗传进化特征,以期为PEDV 的有效防控提供理论依据。……
