宋波，黄猛，徐冬，丰新倩，李庆

1 淄博市第一医院检验科，山东淄博255200；2 淄博市分子免疫检验医学重点实验室；3 青岛大学附属医院检验科；4 淄博市第一医院风湿免疫科

类风湿关节炎（RA）以进行性关节损伤和关节外表现为特征，可导致永久性残疾，严重影响患者生活质量。近年来RA的诊疗取得一定进展，但早期诊断不及时仍会影响治疗效果。DAS28是基于RA患者压痛关节数（TJC）、肿胀关节数（SJC）、红细胞沉降率（ESR）、疼痛视觉模拟评分（VAS）评估疾病活动度，是目前临床评估RA疾病活动度最常用的指标。但DAS28在临床应用中存在一定的局限性，如ESR受到贫血、红细胞压积、生理因素等影响［1］；在关节的轻微肿胀评估方面，主要依靠临床体格检查，带有主观性和局限性。ESR、C反应蛋白（CRP）可以在一定程度上反应RA疾病活动程度，但ESR、CRP都是炎症的非特异性标志物，易受到年龄、贫血和免疫球蛋白、类风湿因子等影响，导致其敏感度和特异度不佳。因此迫切需要更准确的RA疾病活动度评价指标。肝素结合蛋白（HBP）是一种储存在嗜天青颗粒和中性粒细胞分泌小泡中的糖蛋白，在全身炎症反应早期中性粒细胞活化时释放［2］。HBP可以激活单核细胞、成纤维细胞和T细胞，并通过刺激肿瘤坏死因子α（TNF-α）生成来增强炎症反应［3］。同时HBP可增加血管内皮细胞的渗透性，引起炎性疾病中的血管功能障碍和血浆渗漏，导致组织水肿［4-5］。研究发现，HBP在自身免疫性疾病中表达增加，HBP水平升高与自身炎症性疾病相关［6-7］。然而HBP在RA患者中的变化及意义鲜有报道。本研究通过检测活动期RA患者血浆HBP水平，探讨HBP对RA疾病活动度的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2021年7月—2022年12月淄博市第一医院收治的215例RA患者（RA组），男31例、女184例，年龄18～83（58.3 ± 10.7）岁，病程0.1～40（6.2 ± 6.8）年。RA的诊断根据美国风湿学会（ACR）和欧洲抗风湿联盟（EULAR）2010修订的RA分类标准［8］。采用DAS28评分评价疾病活动度，缓解期RA 100例，活动期RA 115例（轻度16例、中度65例、重度34例）。排除感染、良恶性肿瘤、器官衰竭、其他免疫疾病、病例资料不全、妊娠患者。另选择同期健康体检者60例作为对照组，男15例、女45例，年龄31～72（59.1 ± 7.3）岁。两组性别、年龄具有可比性。本研究通过淄博市第一医院伦理委员会审核批准（批号：YXLL2021072269），获得研究对象或其代理人知情同意。

1.3 血浆HBP检测 采集受试者空腹静脉血3 mL，EDTA-K2抗凝，2 000 r/min离心10 min，分离血浆，-80 ℃冷冻保存。使用全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特）、透射比浊法检测血浆HBP。

1.4 RA患者炎症指标检测 采集受试者空腹静脉血3 mL，置于促凝管中，离心分离血清，使用全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特）、透射比浊法检测CRP，全自动化学发光分析仪（苏州立禾）、化学发光法检测TNF-α。采集受试者空腹静脉血1.6 mL，枸橼酸盐抗凝，魏氏法检测ESR。

1.5 统计学方法 采用SPSS22.0统计软件。计量资料采用Shapiro-Wilk法进行正态性检验，数据均不符合正态分布，以M（P25，P75）表示。多组间比较采用Kruskal-WallisH检验，两变量间的相关性检验采用Spearman相关分析法，受试者工作特征（ROC）曲线分析HBP对RA疾病活动度的诊断价值。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血浆HBP水平比较 RA组活动期、缓解期及对照组的血浆HBP水平分别为18.05（14.73，22.25）、8.80（7.40，11.62）、7.40（5.63，8.80）ng/mL，活动期RA高于缓解期RA和对照组（P均＜0.05），缓解期RA与对照组比较差异无统计学意义（Z=-0.706，P＞0.05）。活动期RA患者中，轻、中、重度患者的血浆HBP水平分别为13.70（12.60，14.68）、17.20（14.80，22.30）、21.25（19.08，30.23）ng/mL，重度患者高于中度和轻度患者，中度患者高于轻度患者（P均＜0.05）。

2.2 活动期与缓解期RA患者炎症因子水平比较与缓解期RA相比，活动期RA患者血ESR、CRP、TNF-α水平升高（P均＜0.05）。在活动期RA患者中，重度患者血ESR、TNF-α高于轻度和中度患者，中度患者高于轻度患者（P均＜0.05）；重度患者血CRP高于轻、中度患者（P均＜0.05），轻、中度患者之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

2.3 活动期RA患者血浆HBP水平与炎症因子的相关性 活动期RA患者血浆HBP水平与血ESR、CRP、TNF-α均呈正相关（r分别为0.442、0.581、0.478，P均＜0.05）。

2.4 血浆HBP对RA疾病活动期的诊断效能ROC曲线显示，血浆HBP评估活动期和缓解期RA的最佳诊断临界值为12.7 ng/mL，其ROC曲线下面积0.969，诊断活动期RA的敏感度为93.9%，特异度为84.0%。HBP评估活动期和缓解期RA的AUC高于ESR、CRP（P均＜0.05）。见表2。

表2 血HBP、CRP、ESR对活动期和缓解期RA的诊断效能

3 讨论

HBP由中性粒细胞分泌，通过β2整合素介导中性粒细胞可被HBP激活，与血管内皮细胞黏附因子结合，改变血管内皮细胞通透性，引起血管渗漏［9］；HBP释放后首先作用于血管内皮细胞，与内皮细胞表面多糖受体结合，引起钙离子活化和细胞骨架重排，通过增加内皮细胞间隙改变细胞通透性，从而导致大分子渗漏和组织损伤［10］。血管翳是RA的病理基础，其内包含新生微血管，HBP可以诱导血管内皮细胞的间隙增加和破坏，造成炎症相关细胞外渗至关节腔中［11］。文献报道，在关节滑液中存在中性粒细胞和TNF-α等细胞因子，可能导致骨侵蚀和软骨退化［12-13］。HBP作为细菌感染性疾病常用的诊断及病情严重程度评估指标，在早期识别脓毒症及病情评估方面具有较好的灵敏度和特异度［14］。急性期关节炎患者关节腔积液内存在中性粒细胞和HBP［15］，HBP水平升高可能与其介导的炎症反应有关［16］。

本研究比较了115例活动期RA患者、110例缓解期RA患者、60例健康对照组的HBP水平，结果显示活动期RA患者HBP水平显著高于缓解期RA患者和健康对照组，提示RA作为一种自身免疫性炎症，其活动期白细胞释放HBP增加。进一步分析表明，HBP水平随着RA疾病活动度的升高而升高，重度患者高于中度和轻度患者，中度患者高于轻度患者。我们推测，HBP在RA活动期可能参与血管渗漏和关节水肿的进程，同时HBP在RA活动期时激活单核细胞，增加TNF-α的释放，扩大炎症反应，参与RA炎症发生发展过程。因此，HBP可能是RA炎症发生发展的重要介质。

ESR、CRP是全身炎症反应指标。ESR可反映RA疾病活动程度，ESR加快的RA患者晨僵时间更长，症状更重，但ESR容易受到生理因素（年龄、性别、女性生理周期等）影响［17］。CRP由肝脏合成，作为急性时相反应蛋白可在RA活动期升高，但其特异度较低［18］。TNF-α是RA发生发展中的重要炎症介质，其可促进软骨损伤和骨质破坏［19］。本研究结果显示，与缓解期RA相比，活动期RA患者血ESR、CRP、TNF-α水平均显著升高，且随着疾病活动度加重而增加。进一步进行相关性分析显示，活动期RA患者血浆HBP水平与血ESR、CRP、TNF-α均呈正相关。这表明与其他炎症指标一样，血浆HBP也可以反映RA疾病活动状态。进一步采用ROC曲线分析血浆HBP对RA疾病活动期的诊断价值，结果显示，血浆HBP评估活动期和缓解期RA的敏感度为93.9%，特异度为84%，敏感度和特异度均高于血ESR、CRP。表明血浆HBP对评估RA疾病活动度具有一定价值。

综上所述，活动期RA患者血浆HBP水平升高；血浆HBP与疾病活动度相关，对RA活动度诊断有一定价值，可能成为活动期RA的生物标志物。