李玉娟，张瀚文，刘珊，王佳平，李勇枝

（1.北京理工大学 生命学院，北京 100081；2.中国航天员科研训练中心航天员健康中心重点实验室，北京 100094）

肠上皮屏障对维持机体内环境稳态、防护人体健康具有重要作用.肠上皮细胞间的连接是肠上皮屏障的重要构成[1]，主要包括紧密连接、黏附连接、桥粒、缝隙连接等[2].其中，紧密连接主要是由闭锁连接蛋白-1（Zonula Occludens-1，ZO-1）、闭合蛋白（Claudins）、咬合蛋白（Occludin，OCN）等一系列跨膜蛋白构成的蛋白复合体.ZO-1 作为紧密连接蛋白复合体中的一种重要蛋白，可以与OCN、Claudins、α-连环蛋白等进行相互作用，调节肠上皮细胞旁路的渗透性直接保护肠屏障[3−4].ZO-1 可将紧密连接与构成肠上皮细胞骨架的肌动蛋白相连，参与调节肠上皮细胞内肌动蛋白丝的收缩，进而维持肠上皮屏障的低渗透性[5−6].ZO-1 蛋白还可以招募并高度富集紧密连接相关蛋白（如，带蛋白Cingulin）到其相应位点，从而维持紧密连接有助于保护肠屏障的完整性[7−8].ZO-1 能够直接与细胞转录因子（如ZO-1 相关核酸结合蛋白、转录共激活因子相关蛋白等）进行相互作用[9]，调控肠上皮细胞的生长、增殖[10]，以及胞内信号传导（如：Wnt/β-catenin 信号通路）而有助于肠黏膜修复[10−11]，以保护肠黏膜屏障的正常功能.综上所述，ZO-1 蛋白在维持肠上皮屏障的完整性中具有关键作用.

目前，检测ZO-1 的常用方法为免疫荧光法（immunofluorescence，IF）、蛋白质印迹法（western blot，WB），这两种方法均使用了ZO-1 抗体.但抗体的成本相对较高、稳定性较差、且不易运输与保存，因此也需要开发一种成本较低、稳定性较高、特异……