基于ttr基因的mini-MPN-qLAMP法快速定量检测食品中沙门氏菌
2023-02-13章小洪郑连宝陈卫平王伟影贺云鹏方芳胡彤
章小洪,郑连宝,陈卫平,王伟影,贺云鹏,方芳,胡彤
(1.丽水市质量检验检测研究院,浙江丽水 323000)(2.浙江工业大学生物工程学院,浙江杭州 310032)(3.德清县食品药品检验检测中心,浙江湖州 313200)(4.衢州市食品药品检验研究院,浙江衢州 324000)
沙门氏菌是一种重要的食源性致病菌,该菌主要污染的食品有肉、蛋、乳等禽肉类制品和速冻食品。一旦发生沙门氏菌污染的情况,食品生产环境中残留的沙门氏菌不易控制,存在交叉污染的安全隐患[1,2]。消费者食用了被沙门氏菌污染的食品容易引起腹泻甚至败血症等食物中毒的现象。全球细菌性食物中毒事件中,沙门氏菌引起的食物中毒长期占据榜首[3]。GB 4789.4[4]中,沙门氏菌的检验程序繁琐,需要4~6 d才能确认结果,当前急需一种高效、低成本的快速沙门氏菌检测方法。因此,开发新的沙门氏菌检测方法一直是一个热点研究方向[5]。近年来核酸检测技术的迅速发展带动了食品检测技术的进步,其中荧光定量PCR(Real-Time Quantitative Polymerase Chain Reaction,qPCR)技术被应用于食品中沙门氏菌的检验[6]。荧光定量环介导等温扩增技术(Quantitative Loop-Mediated Isothermal Amplification,qLAMP)、重组聚合酶扩增等技术在沙门氏菌检测中也取得了重要进展[7,8]。这些等温扩增技术一方面减少了昂贵的PCR仪器使用,另外也将沙门氏菌的检测效率大大提高了。
在食品微生物的定量检测中,MPN(Most Probable Number,MPN)计数法是一种基于概率计算的计数方法,相比平板计数法具有更高的灵活性,且检出限可根据加样量进行调整,因此广泛用于食品中大肠菌群、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌等微生物的定量检测。……
