范柳倩，孟洁琼，程国平

浸润型原发性乳腺癌中ER、PR、Ki-67增殖指数和HER-2，是最显著的预后相关预测因素。同时，能有效指导治疗[1]。ER阳性患者可从内分泌治疗中受益，PR也具有类似的指导作用。有研究报道15%～20%乳腺癌中HER-2过表达，其表达与较高的复发率和病死率相关。Ki-67增殖指数是乳腺组织中肿瘤细胞的主要参考检查之一。组织样本处置是分析前阶段的关键影响变量，根据美国临床肿瘤学协会(ASCO)及美国病理医师学院(CAP)的相关指南进行操作[2]。目前，临床相关指南建议乳腺癌切除样本应尽可能在短时间内固定，离体时间应低于1 h，但离体时间过长对ER、PR、HER-2等免疫组化染色结果的影响相关报道仍较少。本科室经过多年摸索，总结了组织离体时间对乳腺癌免疫组化染色重要标志物的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集2020年6月～2021年10月来我院就诊且接受手术的8例乳腺癌组织。纳入标准：(1)明确诊断乳腺癌且接受手术切除治疗；(2)术中可获得足够组织样本用于实验分析。排除标准：(1)患者接受新辅助化疗；(2)有既往乳腺手术史；(3)免疫组化染色失败。

1.2 组织样本处理每例标本根据不同离体时间(0、0.5、1、2、4、24、48 h)及室温下和4 ℃冰箱保存，分为14个组织，合计112个标本。标本均经10%中性福尔马林固定8～48 h，按常规行组织处理，包埋，3 μm厚连续切片。行HE染色，采用免疫组化检测ER、PR、HER-2和Ki-67的表达。载玻片上未染色的组织切片于干燥箱内加热1 h，干燥温度为60 ℃。ER评估采用单克隆抗体SP1(Ventana, Tucson, AZ)；使用单克隆抗体1E2(Ventana)评估PR；4B5抗体(Ventana)对HER-2进行分析，Ki-67采用MIB-1单克隆抗体进行检测。……