维多利亚蓝弹性纤维染色常见问题分析与质量控制
2022-12-21虞文伟张顺民郑建明冼志红
临床与实验病理学杂志 2022年11期
虞文伟,张顺民,郑建明,唐 峰,冼志红
特殊染色技术在日常病理诊断中具有重要意义[1-2],弹性纤维染色对评估疾病组织中弹性纤维变化、恶性肿瘤的血管侵犯及某些肿瘤的鉴别诊断有重要价值[3-4]。经典的Verhoeff弹性纤维染色法只能显示粗大的弹性纤维[5];维多利亚蓝弹性纤维染色步骤相对较少,可显示细小弹性纤维,颜色清新;与Van-Gieson复染组合,可对结缔组织成分做出良好的评估。为了普及和提高该染色技术,上海市临床病理专科委员会联合上海市临床病理质量控制中心,对上海市50家医院病理科进行了维多利亚蓝弹性纤维染色技术室间质量控制测评。本文对测评中出现的染色缺陷的关键问题进行分析,并探讨其主要原因及解决方案,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料收集2021年5月上海交通大学附属新华医院病理科肺肿瘤切除标本,选择5例含有胸膜和肺腺癌的代表性蜡块,由上海医学会病理分会技术组专家制作特殊染色比赛切片。
1.2 方法
1.2.1切片 标本均经10%中性福尔马林固定,常规取材,组织脱水,石蜡包埋,4 μm厚连续切片,行HE染色。将5例石蜡标本切片分发至各参评单位,行维多利亚蓝弹性纤维染色。
1.2.2试剂 (1)高锰酸钾溶液;(2)草酸溶液;(3)弹性纤维染液;(4)Van-Gieson染液。试剂经2~8 ℃冰箱保存待用,维多利亚蓝弹性纤维染色液购自贝索生物公司。
1.2.3染色步骤 (1)石蜡切片常规脱蜡至水;(2)高锰酸钾溶液氧化5 min,稍水洗;(3)草酸溶液漂白2~3 min至切片无色为止,细流水冲洗;(4)95%乙醇稍洗,浸入弹性纤维染液中常温作用8~24 h(加盖,避免染液挥发);……
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