檀学文，陈维乐，陈义昭，方亦龙，蒋海峰，许 振，涂佳杰，魏 伟

巨噬细胞是固有免疫系统中的重要细胞，与肿瘤发病密切相关[1-2]。活细胞工作站及其自带的培养系统，能模拟活细胞的生活环境，是一种体外研究细胞行为的重要方法[3-5]。目前流式细胞术被广泛用于检测最终的细胞吞噬比例，但不能体现动态吞噬过程[6]。巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的过程是肿瘤微环境中一种复杂的相互作用[7]，利用活细胞工作站直接记录巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的动态过程有助于进一步研究这一复杂过程，并且能够继续探讨巨噬细胞吞噬肿瘤细胞后对CD8+IFNγ+细胞毒性T细胞激活的影响。该研究利用活细胞工作站，建立了巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的体外模型，这为深入研究巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的动态过程提供了一种可靠的实验方法，同时研究巨噬细胞吞噬肿瘤细胞后增强T细胞的抗原提呈作用，证实其能活化细胞毒性T细胞对肿瘤的杀伤作用。

1 材料与方法

1.1 细胞株人源单核细胞系THP-1和人源子宫内膜癌细胞系Ishikawa购自武汉普诺赛公司。

1.2 试剂与仪器DMEM无酚红高糖培养基、RPMI 1640培养基、MEM培养基、磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)、胎牛血清购自以色列BI公司；胰蛋白酶、青-链霉素溶液购自上海碧云天生物技术有限公司；非必需氨基酸购自美国Gibco公司；荧光染料CFSE购自上海贝博生物科技有限公司；Brilliant Violet 421 anti-human CD11b、Brilliant Violet 421 anti-human CD8、PE/Cy7 anti-human IFNγ、PE anti-human CD3购自美国Biolegend公司；ProLongTMLive Antifade Reagent购自美国ThermoFisher公司；人源淋巴细胞分离液购自北京达科为生物技术有限公司；玻璃底成像皿购自北京兰杰柯科技有限公司；……