纪海茹，孔令伟，曹 胜，吕家兴，李佳欣，刘春雨，金 宇

骨肉瘤作为最常见的原发性恶性骨肿瘤，常伴有突变和转移，患者预后极差。虽然化疗和手术可以让骨肉瘤患者生存率有所提高，但转移性或复发性骨肉瘤患者的存活率仍然很低，患者5年总体生存率不到20%[1]。由于肿瘤的恶性进展依赖于肿瘤相关分子的调控，因此寻找与骨肉瘤恶性表型和临床预后相关的新型标记物尤为重要。组织蛋白酶S (cathepsin S,Cat S)作为半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员，可通过调控结缔组织和基底膜的溶解和重塑，影响机体炎症和免疫反应，并最终促进肿瘤生长[2]。近年来文献报道[3-4]，Cat S在肝细胞癌等多种癌症中高表达，并对肿瘤细胞的恶性表型例如增殖和侵袭发挥促进作用。然而，尚未有研究报道Cat S在骨肉瘤中的具体作用。该研究旨在探讨Cat S对人骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与耗材人正常成骨细胞(hFOB)和人骨肉瘤细胞(SAOS2和MG63)购自中国科学院上海细胞研究所；DMEM培养基(货号：170217083240)、10%胎牛血清(货号：SH30070.03E)、1%链霉素/青霉素(货号：SV30010)和胰蛋白酶(货号：SH30042.01)购自美国Hyclone公司；TRIzol RNA裂解液(货号：GS101-01)、RIPA蛋白裂解液(货号：T15196)和BCA蛋白定量试剂盒(货号：KL80816-500)购自北京全式金生物有限公司；Transwell小室(货号：3413)和Matrigel基质胶(货号：HYC021M01)购自美国Corning公司；Cat S特异性siRNA干扰序列(si-Cat S)和阴性对照序列(si-NC)合成自美国Qiagen公司；cDNA逆转录试剂盒和快速定量SYBR®Green RT-PCR试剂盒购自美国Sigma公司；CCK-8细胞活性检测试剂盒和LipofectamineTM2000转染试剂盒购自上海碧云天生物科技有限公司；……