曾友玲，张 清，曾 洁，王 欢，侯 俐

卵巢癌是世界范围内最常见的生殖系统肿瘤之一，恶性程度较高[1-2]。卵巢癌的治疗在近十几年中得到较大的发展，然而多数患者的预后仍不能满足临床需求[3]。高度的增殖性和侵袭性是卵巢癌预后较差的重要原因之一[4]。探讨卵巢癌生长和转移的分子发生机制，是卵巢癌有效分子治疗靶点研究的重要方向。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是细胞内具有重要功能的单链RNA分子，其广泛参与众多疾病的进展[5-6]。近年的研究[7-9]证实，卵巢癌组织中存在lncRNA的异常表达，其表达水平与卵巢癌的耐药性、放疗敏感性密切相关。lncRNA在卵巢癌中的功能引起了研究们的广泛关注。lncRNA SPINT1-AS1是目前发现的在恶性肿瘤中高表达的lncRNA，沉默lncRNA SPINT1-AS1的表达具有抑制细胞恶性侵袭和生长的作用[10-12]。该研究通过DIANA TOOLS数据库发现lncRNA SPINT1-AS1和miR-211-5p可能互为靶向关系。miR-211-5p是一个在卵巢癌中表达下调的抑癌基因，恢复其表达可抑制卵巢癌的生长和进展[13]。该研究通过检测卵巢癌组织和细胞系中lncRNA SPINT1-AS1的表达，旨在探究下调lncRNA SPINT1-AS1对卵巢癌SKOV-3细胞增殖和侵袭的影响，验证lncRNA SPINT1-AS1在卵巢癌细胞中的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞与试剂 永生化卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌细胞系(SKOV-3、A2780、OC3、HO-8910)均购自中国科学院上海细胞库。Lipofectamine 3000转染试剂购自美国Thermo Fisher公司。胎牛血清和细胞培养基均购自美国Hyclone公司。lncRNA SPINT1-AS1 siRNA(CAGGATCGAAGA-GGGCGCA)、mimics control、miR-211-5p mimics、siRNA control均由武汉巴菲尔生物技术服务公司构建。荧光素酶报告载体SPINT1-AS1野生型(WT)、SPINT1-AS1突变型(MUT)载体由上海剑钝生物科技有限公司构建。MTT试剂盒和Transwell小室购自大连美仑生物技术有限公司。……