李艳玲，李昱昊，孙晓梅，张 军，张素梅，张胜权

胆固醇是哺乳动物细胞中重要的脂质分子，可以调节生物膜的流动性[1]。胆固醇在体内可以转化成类固醇激素、胆汁酸和氧化固醇调控机体的生长发育等生理过程。胆固醇代谢异常参与了动脉粥样硬化、癌症、阿尔茨海默病和其他神经退行性疾病的发生发展。羊毛固醇合成酶(lanosterol synthase，LSS)催化(S)-2，3-氧化喹烯环化合成羊甾醇形成甾醇核的反应[2]。Mori et al[3]证实LSS基因的错义突变可导致先天性白内障。羊毛固醇转化为胆固醇有两种途径：Bloch途径和Kandutsch Russell途径。在小鼠中，Bloch途径介导了睾丸、脾脏和肾上腺中90%或更多的胆固醇生物合成，而大脑70%以上的胆固醇生物合成来自脑星型胶质细胞[4]。该研究通过LSS(+/-)小鼠与野生型(wide type，WT)小鼠全脑基因表达谱分析，经过数据筛选和基因表达谱的聚类分析，找出差异表达基因，为进一步研究胆固醇代谢对动物行为学的影响及在神经系统疾病中的作用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物委托南京生物医药研究所构建LSS(+/-)小鼠，回交繁殖，取8周龄LSS(+/-)雌鼠及WT雌鼠全脑组织委托华大基因公司进行RNA-Seq分析(n=3)，同时取全脑组织进行实时定量荧光PCR及Western blot分析。动物实验方案符合安徽医科大学动物伦理委员会相关规定。

1.2 试剂裂解液 RIPA、SDS-PAGE(5×)、Trizol、蛋白预染 Mark 购自美国Thermo Fisher Scientific公司；Tris、甘氨酸、SDS 购自上海生物工程有限公司；Tween-20 购自美国Sigma公司；抗体稀释液购自美国TOYOBO 公司；10×Loading Buffer、 DL2000 DNA Ladder 购自美国TAKARA 公司；蛋白胨、琼脂粉、蛋白胨购自美国OXOID公司；EB购自赛百盛基因技术有限公司；鼠尾基因鉴定试剂盒购自上海碧云天生物有限公司。……