梁佩芳，杨道茂

（1.开封大学 医学部，河南 开封 475000；2.华侨大学 化工学院，福建 厦门 361021）

单萜类物质主要存在于挥发油中，有止痛、抑菌、作昆虫信息素及昆虫驱避剂等作用，广泛应用于医药、香料等方面［1］。单萜类化合物由于结构简单、价格低廉，一直是理想的生物转化底物。细菌、真菌、酵母菌和植物细胞等都可以充当生物催化剂角色完成对柠檬烯［2］、α-蒎烯和β-蒎烯［3］的转化工作，在已报道的微生物催化剂中，细菌占41%，真菌占33%［4］。比如：在细菌中，假单胞属细菌（Pseudomonas sp.）能以D-柠檬烯为唯一碳源和能源转化合成紫苏醇［5-6］，继而进一步氧化成紫苏醛和紫苏酸［7-8］。在真菌中，尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum 152b）可以将R-（+）-柠檬烯和S-（-）-柠檬烯转化为R-（+）-α-terpineol和limonene-1,2-diol［9］；指状青霉（Penicillium digitatum）和解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）可以将（+）-柠檬烯分别转化为α-萜品醇（α-terpineol）［10］和紫苏酸［11-12］；白曲霉可以转化（+）-柠檬烯，主要转化产物为异辣薄荷酮［13］。

除了从细菌和真菌菌种库中筛选具有生物转化剂功能的微生物外，近年来植物内生真菌在生物催化领域的作用开始受到重视，并且已经有利用植物内生真菌转化单萜化合物的文献报道。比如从海藻Bostrychia radicans分离到的内生真菌Botryosphaeria sp.能将外消旋樟脑转化为6-endo-羟基樟脑、6-exo-羟基樟脑、5-exo-羟基樟脑、5-endo-羟基樟脑、3-exo-羟基樟脑和8-羟基樟脑［14］。火炬松（Pinus taeda）来源的植物内生真菌Phomopsis sp.能转化1%的柠檬烯合成0.536 g/L香芹酮和2.08 g/L柠檬烯-1,2-二醇，如果用柑橘皮提取物为底物则生成2.10 g/L柠檬烯-1,2-二醇［15］。因此，无论从理论还是从实践上看，用植物内生真菌生物转化单萜类化合物具有可行性。

本实验选取无环单萜的月桂烯、单环单萜的（+）-柠檬烯和（-）-柠檬烯为代表，以假臭草来源的5株内生真菌作为测试菌株，采用GC-MS手段分析转化产物，以期为工业生物催化寻找合适的微生物菌种。……