李蓉　朱疆　付匿

关键词：马齿苋;离体心脏;心肌收缩力;实践教学

马齿苋（Portulaca oleracea L.）别名爪子菜、长命菜、豆瓣菜等，分布于云南全省，多生于潮湿杂草地、荒地、田边、路边[1]，含有多种化学成分，主要有生物碱类、萜类、香豆素类、黄酮类、有机酸类等成分，具有抗炎、镇痛、抑菌、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗氧化等作用[2]。李蓉等[3]研究发现，马齿苋对正常离体心脏和离体衰竭心脏的心肌收缩力均有明确的增强作用。本课题主要在此基础上进一步研究马齿苋对离体心脏的作用，以获得最适宜的给药浓度与剂量，用于楚雄医药高等专科学校中药专业中药药理学的实践教学，以不断完善、推广运用于更多的医学院校，解决长期以来教材中的实践教学内容相对较少的问题，从而实现更好地培养学生实践能力、创新能力和动手能力的教学目的。

1实验材料

1.1实验动物

健康牛蛙60只，雌雄不限，体重（250±50）g，购于当地水产品市场，并由楚雄医药高等专科学校生物学教师鉴定为健康合格牛蛙，课题组成员均已参加云南省实验动物从业人员专业培训，并获得实验动物研究资格，整个实验过程符合实验动物伦理学规范。

1.2药物与试剂

马齿苋全草，采于云南省楚雄医专校园周边，经该校中药鉴定室鉴定为中药材马齿苋;任氏液;纯化水。

1.3主要仪器

数显式鼓风干燥箱（101A-3，上海沪粤明科学仪器有限公司）;计算机（启天B4550-B031，联想有限公司）;电子天平（ScoutSE型，奥豪斯仪器有限公司）;多功能红外炉（MC-HI8SO11，中山市家福来电器有限公司）;肌张力传感器、生物机能实验系统（BL-420S，成都泰盟公司）;中藥保健壶（JK-23，广东时珍电器有限公司）;恒温水浴锅（HWS-28，上海一恒）;蛙心夹、蛙心套管（成都泰盟公司）。

2实验方法

2.1药物制备

2.1.1 5种马齿苋水煎液的配制（按实验小组自行制备）

由老师带队组织学生参与新鲜马齿苋的采摘，每小组1～2名学生，采摘后取全草，洗净烘干后，剪成小段，称取5g，加适量纯化水浸泡约30min，大火煎煮至沸腾后，改为小火继续煎煮30min，过滤，药渣再加适量纯化水煎煮15min，过滤。合并两次过滤液，于水浴上浓缩配制成50.0mL，冷却后置于冰箱冷藏保存，用纯化水稀释成0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6%5种马齿苋溶液。

2.1.2任氏液的配制

按参考文献[4]的配方配制任氏液。配方：NaCl 6.50g/L，KCl 0.14g/L，NaHCO 0.20g/L，NaHPO0.01g/L，葡萄糖2.00g/L，CaCl0.12g/L。

2.2不同质量分数马齿苋对离体蛙心心肌收缩力的影响

取60只牛蛙，随机分为对照组、0.1%马齿苋组、0.2%马齿苋组、0.4%马齿苋组、0.8%马齿苋组、1.6%马齿苋组，每组10只。所有牛蛙均用脊髓破坏针从枕骨大孔处插入破坏蛙的脑和脊髓，用斯氏（Straub）离体蛙心法[4]制备离体蛙心标本后，向蛙心套管内灌注0.5mL任氏液，再用蛙心夹夹住心尖，连接在生物机能实验系统的张力传感器上并调整好拉力，即可打开计算机和机能实验系统，记录蛙心的正常收缩张力曲线，待心脏收缩活动稳定后，向对照组蛙心套管内再灌注0.2mL任氏液，观察并记录蛙心收缩变化曲线。其他各组用同样的方法制备离体蛙心标本，待心脏收缩活动稳定后，分别加入0.2mL对应质量分数马齿苋溶液后，同样观察并记录蛙心收缩变化曲线。用TM-WAVE软件进行数据采集、导出与分析。

3实验结果

图1的结果表明，马齿苋对牛蛙离体心脏的灌流具有明显的正性肌力作用，且呈现良好的量效关系。在一定范围内，离体蛙心收缩张力随马齿苋质量分数的增加而增强。当质量分数为0.2%时，正性肌力作用最显著;当质量分数高于0.8%时，心肌收缩力随质量分数增加而有所减弱，但仍高于正常值;当质量分数增加至1.6%时，心肌收缩张力反而减弱，提示大剂量马齿苋可能产生心脏毒性，进而出现抑制作用。因此，学生在实践课上主要观察了正常离体心脏收缩，借鉴了李蓉等[3]用缺钙任氏液导致心衰的研究，再用0.2%马齿苋进行解救，获得了良好的教学效果。

4结论与讨论

马齿苋对离体牛蛙心脏收缩力有明显的增强作用，尤其是在质量分数为0.2%时，作用最显著。21世纪，高等教育的战略目标是培养具有一定科研创新能力的人才，因此，培养学生的科研能力和创新能力具有重要意义[5]。本实验更好地体现了研究性教学，强调了教师研究性地教与学生研究性地学的有机融合，充分体现了创新教育理念。开展研究型教学有利于学生综合能力的提升、有利于学生创新能力的培养、有利于学生学习能力的提高[6-7]。

近三年，楚雄医药高等专科学校教师利用身边的药材让学生全程参与中药药理学课程教学，课时设置为4学时，关于新鲜药材的采摘、净制、煎煮的方法和药液的配制等，都由各实验小组自行解决，由教师进行指导。从离体蛙心标本的制备到实验结果的处理与分析，教师通过视频投影的方式边示教边讲解，在一定程度上提高了学生的参与度，也培养了学生沟通与分工合作和思考问题、解决问题的综合能力，同时也激发了学生的专业热情。结果分析出来后，小组之间还会互相比对实验结果，出现差异的小组还会互相找原因，直到理解实验过程中每一步的重要性。学生认为，通过这样的实践课既学到了理论知识，也锻炼了动手能力，会让人非常有成就感，不仅激发了学生对实验的创新意识，还充分调动了学生参与的积极性。本课题主要研究中药药理学的实验教学，让学生了解新药的研究开发过程，为推动高校实验教学和实验室发展提供参考，以期为中药研究开发培养更多的人才，为药学服务、为临床服务。