张丽卿，王建宝，白小娟，刘艳红，李鹏花

(1.山西医科大学汾阳学院，山西 汾阳 032200；2.山西省汾阳医院，山西 汾阳 032200)

类风湿关节炎(RA)是一种慢性炎症性全身性自身免疫性疾病，占全球人数的0.5%[1]，且逐年升高。我国每年有近5万例新增RA患者，门诊及住院费用惊人，严重影响人类健康和生存质量。RA有活动期与稳定期交替发作的特点，活动期给予有效干预可以延缓病情进展，减少关节畸形发生，部分病例可达到长期缓解。因此，准确判断病情对治疗方法的选择及预后尤为重要。目前RA的发病机制仍不明确，越来越多的证据表明RA的发病受(包括基因在内等)多因素的影响[2-4]。Dickkopf-1(DKK-1)是Dickkopf家族的成员，是由两个富含半胱氨酸的结构域和一个信号肽序列组成的分泌蛋白。DKK-1是Wnt/β-catenin信号通路(典型Wnt通路)的内源性可溶性抑制因子。典型的Wnt通路通过模拟成骨细胞的增殖、成熟、分化及相关蛋白的产生，抑制破骨细胞的骨吸收来调节骨重塑[5-6]。DKK-1表达异常引起的骨代谢紊乱参与了骨侵蚀的发病机制[7-9]。关于血清DKK-1在RA中的表达说法不一[10-12]。为此本研究就血清DKK-1水平与RA疾病活动的关系进行研究。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年10月—2019年12月在山西省汾阳医院风湿免疫科门诊及住院治疗的RA患者44 例，其中男14 例，女30 例，年龄(55.68±1.37) 岁。所有患者符合1987年美国风湿病学会(ACR)RA分类标准或者2010年ACR和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)提出的RA新的分类标准。排除患有其他结缔组织病、血液系统疾病、肿瘤、严重感染者。

1.2 研究方法

详细记录RA患者病史及治疗前和治疗3个月后关节压痛数(TJC)、关节肿胀数(SJC)，检测治疗前后红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)水平，计算同一时点的RA患者疾病活动评分(DAS28)。DKK-1试剂盒和标准品购自上海星科生物科技有限公司，严格按试剂说明书采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。ESR用魏氏法检测，CRP和RF用ELISA法检测。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 治疗前RA患者血清中DKK-1与相关指标的关系

RA患者年龄(55.68±1.37) 岁，TJC(7.14±0.85) 个，SJC为(6.90±0.87) 个，ESR为(40.01±7.87) mm/h，CRP为(34.71±6.87) mg/L，RF为(71.89±6.70) U/mL，DAS28为(4.49±0.16)。血清中DKK-1与TJC，SJC，DAS28呈正相关，与ESR，CRP，RF及年龄无相关性(见表1)。

表1 DKK-1与相关指标的关系

2.2 治疗前后RA患者相关指标的比较

治疗后RA患者TJC，SJC，ESR，CRP，RF，DAS28及DKK-1较治疗前下降，差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表2 治疗前后相关指标的比较

3 讨 论

RA是由多种因素引起的一种自身免疫性疾病，可引起关节畸形，导致生活能力下降。目前国际上有关RA的治疗推崇达标治疗，以让每位患者达到完全缓解或低疾病活动度为目标，最大限度地提高患者生活质量。因此，及时明确疾病活动性有利于更好地治疗。

引起RA关节破坏的机制一直备受关注。目前已知Wnt/β-catenin信号通路参与骨骼的生长发育，而DKK-1作为Wnt/β-catenin信号通路的内源性抑制剂，通过与低密度脂蛋白受体相关蛋白-5/6(LRP 5/6)结合，参与骨稳态的调控。这种结合导致了LRP 5/6的失活，并抑制了脆性蛋白、Wnt成员与LRP 5/6的竞争结合。在动物实验中发现，健康大鼠组织中DKK-1表达低于病理组织和坏死组织(炎症组织)。与骨性关节炎(OA)相比，RA个体膝关节滑膜组织中DKK-1表达增加更为明显，且RA中DKK-1可能抑制血管形成，降低成骨细胞功能，负调控软骨形成，从而影响软骨或骨骼发育。这些提示DKK-1可能参与了慢性炎症性关节病的骨代谢异常和发病机制[3]。

DKK-1通过成骨细胞与破骨细胞调控骨代谢。研究[13]发现，RA患者骨密度评分越低血清DKK-1水平越高。国外研究[14]发现，一些炎症因子可以通过激活和增加DKK-1进一步加速骨丢失、促进骨破坏。另有研究[15]发现，抑制骨信号通路的关键蛋白DKK-1比单纯抑制炎症能更好地控制病理性骨侵蚀，进一步证实了DKK-1在骨代谢中的重要作用。有学者应用肿瘤坏死因子(TNF-α)阻断剂抑制DKK-1，发现RA患者的骨破坏逐渐逆转为骨重塑[16]。推测DKK-1表达上调可能成为RA成骨细胞活性抑制的主要机制，对于RA患者中成骨细胞的Wnt信号途径的其他变化还需更深入的研究。关于Wnt/β-catenin信号通路对破骨细胞影响的研究较少，认为主要是通过作用于成骨细胞间接影响破骨细胞的功能。

DKK-1水平与RA患者的疾病活动性、骨破坏等密切相关。研究[17]结果显示，RA患者血清DKK-1水平与病程及ESR，CRP，DAS28呈正相关；RA患者血清DKK-1越高，预示着放射学进展越明显。国外学者对379 例RA患者进行研究发现，血清中DKK-1水平高者骨关节功能下降，同时未发现DKK-1与高水平的DAS28、临床的疾病活动指数(CDAI)、简化的疾病活动指数(SDAI)的相关性，提示DKK-1可能是RA功能障碍的生物标志物[17]；另有研究发现RA患者血清中DKK-1水平与影像学进展呈正相关，与骨密度呈负相关，支持RA中DKK-1的高表达与骨破坏相关[13]。本研究发现治疗后DKK-1水平较治疗前下降，且反映疾病活动性的指标也下降，表明DKK-1可提示疾病活动性。对DKK-1与相关指标的关系分析，证明DKK-1与疾病活动性呈正相关，进一步证明DKK-1可作为反映疾病活动性的指标，与国外研究[13]结论一致。同时我们对DKK-1与ESR，CRP，RF的相关性进行了探讨，得出DKK-1与ESR，CRP，RF无相关性，考虑与ESR，CRP，RF受多种因素影响或病例数较少有关。

综上所述，治疗后RA患者血清中DKK-1水平下降，且DKK-1与RA疾病活动性呈正相关，因此可将DKK-1视为RA疾病活动的生物标志物，对其展开深入研究有利于控制RA患者疾病活动性，延缓疾病进展。