郝媛媛，徐曼，安泓润

河北中石油中心医院产科，河北廊坊065000

绒毛膜滋养细胞是胎盘最主要的组成细胞之一，也是维持胎盘正常功能的最重要的功能细胞，目前普遍认为人绒毛膜滋养细胞的迁移、侵袭功能障碍可能引发子痫前期（PE）的发生［1］。上皮—间质转化（EMT）是上皮细胞转化成间质细胞的过程，细胞转化后极性和黏附功能丢失，但获得了较高的侵袭及迁移能力。目前研究已经证实，人绒毛膜滋养细胞的迁移、侵袭功能障碍与其EMT 过程受损有关［2-3］。miR-200c 是近年来发现的与 EMT 调控有关的miRNAs 家族成员之一，其在PE 大鼠胎盘组织和PE 患者的血清中表达均明显升高，但其异常升高是否影响绒毛膜滋养细胞迁移、侵袭及EMT 尚不明确［4-5］。2021 年 1 月—4 月，本研究观察了 miR-200c表达对人绒毛膜滋养细胞迁移、侵袭及EMT 的影响，并探讨其可能的机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 细胞：人绒毛膜滋养细胞HTR8/Svneo购自美国ATCC 公司，用含10%胎牛血清的RPMI 1640 细胞培养基，置于37 ℃、5%CO2恒温培养箱中进行培养。主要试剂：TRIzol 试剂、LipofectamineTM2000 脂质体转染试剂均购自美国Invitrogen 公司，8.0 μm 孔径 Transwell 小室购自美国 Corning 公司，Mgtrigel 基质胶购自美国BD 公司；逆转录试剂盒、实时荧光定量检测试剂盒均购自北京天根生化科技有限公司，miR-200c和内参U6引物均购自广州锐博生物技术有限公司；miR-200c 模拟物（miR-200c mimics）、miR-200c 抑制物（miR-200c inhibitor）、miRNA 阴性对照（miR-NC）、Notch1 野生型（WT）和突变型（MUT）荧光素酶报告基因质粒载体均购自上海吉玛制药技术有限公司；一抗Notch1、N-cadherin、Fibronectin、E-cadherin、GAPDH 抗体均购自美国Santa Cruz公司；辣根过氧化物酶标记的二抗IgG均购自武汉博士德公司。……