尚利侠 齐珺 武君华 陈乐 王满妮 王小芳 房婕 王天菊

人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）是目前所知人体最复杂、最具多态性的基因遗传系统，位于第6号染色体短臂，具有高度的遗传多态性，在同种异体组织器官移植及移植物的急性排斥反应中起重要作用。近年来，随着DNA测序技术的快速发展，新的等位基因不断被发现。我们在对2018年中国造血干细胞捐献者资料库陕西分库入库样本进行A/B/C/DRB1/DQB1位点常规检测时，发现3个样本HLA-A位点疑似新等位基因，对这3个样本采用基于ION S5TM平台的下一代测序技术（Next Generation sequencing, NGS）进行鉴定，经向世界卫生组织提交相关信息后，于2019年3月30日被WHO HLA因子命名委员会分别正式命名为HLA-A*02:897、HLAA*02:898、HLA-A*02:899。

材料与方法

1 标本来源 2018年中华骨髓库陕西分库造血干细胞志愿捐献者。先证者一为陕西籍、汉族、女性、32岁；先证者二为陕西籍、汉族、女性、19岁；先证者三为青海籍、蒙古族、女性、20岁。

2 主要试剂和仪器

2.1 主要试剂：北京天根血液基因组DNA提取试剂盒（批号：R7229北京TIANGEN）；SeCore®HLASBT分型试剂（批号：006、007、005、005、006美国One Lambda 公司）；NXTypeTMNGS测序试剂（批号：LOT 002 美国One Lambda 公司）。

2.2 主要仪器：生物安全柜（型号BC-1000ⅡA，苏州安泰空气技术有限公司）；核酸检测仪（型号Gene Quant pro，Biochrom公司）；PCR扩增仪（型号SENSO QUEST，圣欧国际有限公司）；DNA测序分析仪（型号3730xl，美国ABI公司）；ION S5TM测序仪（美国One Lambda 公司）。

3 方法

3.1 标本采集和基因组DNA的提取：采集志愿捐献者外周静脉血5 mL（EDTA抗凝），采用北京天根血液基因组DNA提取试剂盒，严格按照试剂盒操作说明提取DNA，应用Gene Quant核酸蛋白检测仪测定浓度和纯度。

3.2 PCR-SBT（Sanger测序）：严格按照SeCore®HLA-SBT分型试剂盒说明书对提取的DNA进行测序分析。……