陈袁园 袁伯稳 张海涛 贲秀鸾 刘媛媛

(南通大学附属海安医院 1.儿科；2.检验科，江苏 海安 226600)

过敏性紫癜是一种多系统性血管炎，与免疫球蛋白A介导的免疫反应有关，主要影响皮肤、关节、肠道和肾脏[1]，是儿童非血小板减少性皮肤紫癜的最常见原因之一[2]。S100钙结合蛋白A9(S100A9)在炎症过程和免疫应答的调节中起重要作用[3]。S100A9可用于鉴定过敏性紫癜患儿疾病严重程度[4]。正五聚素蛋白3(Pentraxin protein 3，PTX3)促进纤维细胞分化并参与调节炎症和补体激活[5]。PTX3在过敏性紫癜的多系统性血管炎中具有重要作用，参与紫癜性肾炎的发展，并可作为早期生物标志物预测过敏性紫癜[6]。中期因子(midkine,MK) 促进细胞生长，迁移和血管生成[7-8]。Su等[9]发现血清MK水平在过敏性紫癜患儿中显著升高。因此，本研究旨在探讨血清中MK、S100A9、PTX3水平与过敏性紫癜患儿肾脏受累的相关性以及诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 纳入2015年3月～2019年3月我院收治的过敏性紫癜患儿118例为观察组。纳入标准：均经我院病理科依照欧洲风湿病联盟和儿科风湿病欧洲学会定义的标准进行确诊[10]。排除标准：①患有精神疾病者。②长期使用皮质类固醇激素及免疫抑制剂者。③患有其他肾脏疾病者。④患有癌症者。纳入同期至我院进行健康体检的儿童118例为对照组。患儿家属均签署知情同意书，并经医院伦理委员会批准。

1.2 指标检测 采集观察组和对照组清晨肘前静脉血6 mL，进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。MK的ELISA试剂盒购自上海远慕生物科技有限公司(货号：YM-QP11653)。S100A9的ELISA试剂盒购自上海群己生物科技有限公司(货号：KA1050)。PTX3的ELISA试剂盒购自上海古朵生物科技有限公司(货号：GD-G10815)。根据试剂盒的说明书进行ELISA检测。采用生化检测仪测定血尿或蛋白尿水平。

2 结果

2.1 两组小儿的年龄、性别、体质量指数等一般资料比较 两组小儿的年龄、性别、体质量指数等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组基础临床资料

2.2 两组受试人员血清中MK、S100A9、PTX3的表达量 观察组患儿血清中MK、S100A9、PTX3的表达量均显著高于对照组儿童(P<0.05)，见表2。

表2 两组小儿血清中MK、S100A9、PTX3的表达量

2.3 两组受试人员血清中MK、S100A9、PTX3的ROC曲线、AUC、灵敏度、特异度和截断值 以MK的阳性临界值为268.32(pg/mL)，其诊断灵敏度为89.35%，特异度为86.32%；以S100A9的阳性临界值为24.53(μg/ mL)，其诊断灵敏度为94.26%，特异度为94.21%；以PTX3的阳性临界值为1.97 (ng/mL)，其诊断灵敏度为90.18%，特异度为91.42%。见表3、图1。

表3 两组受试人员血清中MK、S100A9、PTX3的AUC、灵敏度、特异度和截断值

图1 两组受试人员血清中MK、S100A9、PTX3的ROC曲线

2.4 血清中MK、S100A9、PTX3联合诊断过敏性紫癜患儿 患有过敏性紫癜的为真阳性，未患有过敏性紫癜的为真阴性。以MK的阳性临界值为268.32(pg/mL)，S100A9的阳性临界值为24.53(μg/mL)，PTX3的阳性临界值为1.97 (ng/mL)为诊断标准，三者满足其一者为联合诊断阳性，反之则为联合诊断阴性；三者联合对过敏性紫癜的诊断的的灵敏度为97.46%(115/118)，特异度为87.28%(103/118)，准确度为92.37%(218/236)，见表4。

表4 血清中MK、S100A9、PTX3水平联合诊断过敏性紫癜患儿[n(×10-2)]

2.5 血清中MK、S100A9、PTX3水平与过敏性紫癜患儿肾脏受累的相关性 血清中MK、S100A9、PTX3水平均与过敏性紫癜患儿肾脏受累存在正相关(P<0.05)，见表5。

表5 血清中MK、S100A9、PTX3水平与过敏性紫癜患儿肾脏受累的相关性

3 讨论

过敏性紫癜是影响儿童最常见的系统性小血管炎之一[11]。近年来过敏性紫癜的发病率有所增加，每10万名17岁以下儿童中有10～30例。临床表现为可触及的紫癜，关节炎或关节痛，胃肠道症状和肾脏疾病。因此，尽早对过敏性紫癜进行诊断迫在眉睫。

PTX3可以通过促炎细胞因子在外周组织中由几种细胞产生[12]。据报道，血管性血管炎，肺动脉高压和免疫相关疾病患者血浆PTX3浓度较高[13]。过敏性紫癜是一种典型的免疫相关疾病，伴有多系统性小血管炎。在本研究中，观察组儿童血清PTX3浓度高于对照组。PTX3的过量产生可能与血管壁周围的炎性细胞浸润和促炎因子激活有关[14]。Bussolati等[15]发现PTX3在IgA肾病患者肾活检系膜区域的肾小球系膜和内皮细胞上有致密染色；相反，来自其他肾小球肾病患者的正常肾组织和活组织检查显示PTX3表达低。在本研究中，PTX3水平与过敏性紫癜患儿肾脏受累存在正相关。PTX3可能通过产生二次介质如血小板活化因子和组织因子而导致肾损伤[16]。因此，肾小球系膜细胞可用作PTX3的产生者和靶标，且PTX3可能参与肾损伤。

S100A9是一种钙结合细胞溶质蛋白，主要存在于中性粒细胞和巨噬细胞中。S100A9在患有多种炎症的患者中升高[17]。S100A9在胃肠系统炎症期间释放并在非炎症条件下帮助分化[18]。肾脏受累是过敏性紫癜患者的重要预后因素，大约30%的病例有肾脏受累。在本研究中，S100A9与过敏性紫癜患儿肾脏受累存在正相关。体内研究结果表明，高S100A9水平可能是过敏性紫癜患儿肾脏受累的间接指标。由于肾脏受累可能发生在从发病开始的前几天[19]，因此可以更密切地监测具有升高S100A9水平的病例以分析其在肾脏受累中的作用。然而，这需要在更大的样本量中进一步研究。

MK是一种13 kDa肝素结合生长因子，最初被鉴定为参与胚胎发育协调的分子。在健康成人中，MK蛋白的检测水平非常低[20]。MK是Treg细胞扩增的关键抑制因子，并且增加了自身反应性Th1和Th17细胞的数量[21]。过敏性紫癜患者的Th17细胞高于健康对照组，但过敏性紫癜患者Treg细胞的频率低于健康对照组[22]。过敏性紫癜患者中存在Th17/Treg细胞失衡，并且似乎与疾病活动密切相关。因此，MK可能通过促进炎症细胞的聚集而参与过敏性紫癜的发病机制，也可能参与细胞因子的调节。MK参与肾脏的发育，在肾脏器官发生过程中，被认为可调节后肾间充质的上皮和间质祖细胞群之间的平衡[23]。本研究发现血清中MK水平与过敏性紫癜患儿肾脏受累存在正相关。研究[24]表明，MK在肾脏缺血性损伤后直接增强炎症细胞的迁移，并通过诱导趋化因子促进缺血性组织损伤的增加。本研究检测两组血清中MK、S100A9、PTX3的表达量并评价其联合诊断过敏性紫癜的价值，发现血清中MK、S100A9、PTX3水平均与过敏性紫癜患儿肾脏受累存在正相关(P<0.05)，而血清中MK、S100A9、PTX3联合对过敏性紫癜的诊断的的灵敏度为97.46%，特异度为87.28%，准确度为92.32%。

4 结论

血清MK、S100A9、PTX3的表达水平与过敏性紫癜患儿肾脏受累存在正相关，其表达量检测可作为诊断过敏性紫癜患儿的潜在标志。