MTT比色法检测苦瓜MAP30蛋白对5637细胞增殖、MALAT1、HOTAIR及UCA1的影响
2021-12-21杨海霞张鹏陆伦邓秀英陈艳梅
杨海霞 张鹏 陆伦 邓秀英 陈艳梅
(遂宁市中心医院药学部,四川 遂宁 629000)
在细胞活性与生长的检测中,噻唑蓝(MTT)比色法的应用频率相对较高,检测原理主要体现在活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为蓝紫色结晶甲臜并沉积于细胞[1],而在正常状况下,死细胞是无这项功能的。膀胱癌多发生于膀胱黏膜上,是目前临床医学中相对常见、多发的恶性肿瘤之一[2],治疗方法包括手术切除、放疗、化疗等。近年来的相关研究数据表明,作为一种植物蛋白,MAP30(Momoridica anti-HIV protein of 30KD,MAP30)主要从苦瓜种子中提取,实验证实其有多种生物学活性,可参与抗病毒、抗肿瘤、抗菌等[3],但由于MAP30属大分子药物,能有效进入细胞的几率较低,而提高其进入细胞的效率对抗肿瘤应用无疑具有十分突出的作用。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在膀胱癌发生、发展、转归过程中均扮演着重要的作用。最新研究发现[4],肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis related transcription factor 1,MALAT1)、lncRNA HOX转录反义RNA(Long-chain non coding RNA Hox transcription antisense RNA,HOTAIR)及膀胱尿路上皮癌相关1(Urothelial carcinomaassociated 1,UCA1)在膀胱癌中均呈高表达,这提示上述三种物质可能是包括膀胱癌在内的恶性肿瘤的生物学标志物之一。苦瓜MAP30蛋白,对人体中的多种肿瘤细胞均有较好的抑制作用,并可促进其凋亡[5],但与膀胱癌相关的研究却相对较少。因此,本文将在MTT法检测苦瓜MAP30蛋白的基础上探讨苦瓜MAP30蛋白与膀胱癌5637细胞增殖的关系及对MALAT1、HOTAIR及UCA1表达水平的影响。
1 材料与方法
1.1 实验材料 细胞系:膀胱癌5637细胞系(实验样表)均购自中国科学院上海细胞所,而苦瓜则购自本院就近区域的蔬菜批发市场(均属新鲜稚嫩苦瓜),约500 g。……
