边康麒 费素娟 李莉

(徐州医科大学附属医院消化内科，江苏 徐州 221000)

近年来肿瘤的治疗技术显著提高，明显改善了患者的预后及生存率，但胃癌患者的5年生存率仍然较低[1]。虽然有大量的研究探究了胃癌的临床诊断方法以及化疗药物，但胃癌患者依然存在预后较差、复发率高等问题[2]。胃癌细胞的恶性增殖以及侵袭、迁移能力的增强是导致患者肿瘤组织生长、转移的主要原因，也是患者死亡率较高的主要诱导因素[3]。因此，探究胃癌细胞增殖、侵袭、转移的分子机制对改善患者的生活质量，提高预后存活率具有重要的意义。长链非编码RNA(long chain non-coding RNA, LncRNA)是一类非编码蛋白的RNA，可通过介导下游靶基因的沉默或激活，参与肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学过程[4-6]。LncRNA MIR4435-1HG 位于人染色体2q13，目前其对胃癌细胞恶性生物学行为的影响和机制还未知。因此，本文通过下调LncRNA MIR4435-1HG的表达量，观察其对胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响，为胃癌的靶向分子诊断以及新药物的研发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验主要材料 人胃癌细胞系(MGC-803、MKN45、AGS)以及胃黏膜上皮细胞GES-1购自美国生物标准品收藏中心公司，胎牛血清、RPMI-1640、DMEM培养基、F-12K培养基购自杭州四季青生物工程有限公司，Trizol试剂、Lipofectamine 2000、荧光定量PCR(Quantitative polymerase chain reaction, qPCR)试剂盒、凋亡试剂盒购自美国Invitrogen公司，细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8, CCK-8)购自日本株式会社同仁化学研究所，MIR4435-1HG-wt、MIR4435-1HG-mut双荧光素酶报告载体购自上海吉凯基因公司，Mataigel胶购自美国BD公司，Transwell小室购自美国Corning公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞的培养 GES-1、MGC-803细胞培养……