秦铁城，杜润爽，宋雪飞

胶质瘤是一种脑部常见的恶性肿瘤，具有侵袭性强和术后复发率、死亡率高等特点；尽管近年来胶质瘤在治疗方面取得了很大进步，但其预后效果仍不太理想。因此，深入了解胶质瘤发生发展的分子机制，寻找新的有效的治疗策略十分必要。RNA 解螺旋酶DDX5（DEAD-box helicase 5）是一种生物学功能多样的核蛋白，在胚胎发育、细胞增殖、凋亡和核糖体生物合成等过程中发挥着重要作用。研究显示，DDX5 在乳腺癌、肝癌和胃癌等多种肿瘤中异常高表达，且可通过调控细胞生物学行为参与肿瘤的发生与发展。近年来，有研究指出，DDX5 在胶质瘤中表达上调，其表达水平与肿瘤大小、肿瘤分级和颅内转移等密切相关，且具有促进肿瘤细胞增殖和转移的作用，但其对细胞周期和凋亡的影响并不清楚。因此，本研究于2018年3月至2019年4月通过下调DDX5表达探索对胶质瘤SHG44 细胞周期和凋亡的影响及可能机制，旨在进一步揭示DDX5 在胶质瘤发病过程中的作用，为胶质瘤的治疗提供新线索。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂与仪器

人胶质瘤细胞系SHG44( 中科院上海细胞库), 改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified eagle medium,DMEM)(美国Biological Industries),胎牛血清(杭州四季青),青链霉素混合液(北京索莱宝),0.25% 胰蛋白酶(美国Gibco),辣根酶标记的山羊抗鼠或兔IgG 抗体(北京中杉金桥),靶向DDX5 的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)(正向引物5'-GCAAGUAGCUGCUGAAUAUUU-3'/反向引物5'-AUAUUCAGCAGCUACUUGCUU-3')及其阴性对照(NC)siRNA( 正向引物5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'/反向引物5'-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3')(上海吉玛)。兔抗人β 肌动蛋白(β-actin)、β-连环素单克隆抗体和鼠抗人细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、存活蛋白单克隆抗体(美国Santa Cruz),兔抗……