朱云峰，覃艳，曹萌，翟倩倩，李燕，王涛

近年来，由于人们饮食结构的改变，2 型糖尿病和肥胖病人逐年增加，严重威胁人民生命健康。胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）是2 型糖尿病的重要原因。脂肪组织是发生IR 的场所之一，多种脂源性细胞因子如白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、瘦素、抵抗素等参与或调节IR。巨噬细胞（adipose tissue macrophages，ATMs）数量增多，会导致促炎表达型巨噬细胞增多。ATMs 游走到脂肪组织后，致使刺激物增加经典活化巨噬细胞（classically activated macrophage，M1）的招募作用，加重脂肪细胞的功能障碍，诱发IR。目前，ATMs已经成为治疗IR的新靶点。

黄芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）是传统中药黄芪的主要成分之一，具有增强免疫、抗肿瘤、抗氧化等功效。研究发现，APS 具有胰岛素增敏作用，且无明显的毒副作用，APS 干预能提高肥胖大鼠的葡萄糖输注率。目前，APS 对脂肪组织巨噬细胞活化的影响还未知。本研究于2018年11月至2019年5月主要探讨了APS 对TNF-α 诱导的巨噬细胞活化的影响及可能的作用机制，以期为APS用于改善IR提供一定的实验依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器

脂肪细胞株3T3-L1及ANA-1 巨噬细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心；APS：含量90%，美国泛华公司，1000 毫克/支；胎牛血清：美国HyClone 公司；小鼠IL-6 酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒、小鼠TNFα ELISA 试剂盒：上海沪峰生物科技有限公司；PCR试剂盒：日本Takara 公司、大连宝生物有限公司；互补DNA（cDNA）第一链合成试剂盒：美国Fermentas公司；引物由Primer 5.0 软件设计，上海生工科技有限公司合成。

1.2 实验方法

1.2.1

前体脂肪细胞的培养和诱导为成熟脂肪细胞 将3T3-L1 前体脂肪细胞接种于细胞培养板内，用含10% 胎牛血清的高糖DMEM 培养基在37 ℃、5%二氧化碳、97%湿度的培养箱中培养。……