闫红娟，马晓平，李 曼，张 楠，郁晓丹，徐 江

信号素3A(SEMA3A)是信号蛋白家族成员中第一个被研究的潜在肿瘤抑制因子，其被认为是一个候选的抑癌基因。近期研究表明，SEMA3A在不同类型肿瘤，如黏液表皮样癌[1]、舌鳞状细胞癌[2]、头颈部鳞状细胞癌[3]、胃癌[4]、前列腺癌[5]等中均呈低表达。SEMA3B是信号蛋白家族成员，具有抑制肿瘤细胞的功能，是一个位于染色体3p21.3区域的抑癌基因。SEMA3B在黏液表皮样癌[1]、食管鳞状细胞癌[6]、胃癌[7]等多种恶性肿瘤中均呈不同程度的表达缺失和下调。故采用免疫组化法检测SEMA3A和SEMA3B蛋白的表达具有重要意义。抗原修复技术是影响免疫组化染色的重要因素[8]，不同抗原修复法会直接影响SEMA3A和SEMA3B的免疫组化染色质量。选择合适的抗原修复方法是免疫组化成功与否的关键，尤其是关于抗原修复方法和修复液的选择，目前，高压修复和微波修复是两种最常见的热修复方法，枸橼酸缓冲液和EDTA缓冲液是最两种常使用的修复液。免疫组化染色显示SEMA3A和SEMA3B表达主要定位于细胞质。为了更好的展示细胞质抗原免疫组化染色效果，本实验选择了不同的热修复方法和修复液，对上述细胞质蛋白进行免疫组化检测，寻找最佳的修复方法，以提高细胞质抗原染色的准确性和可靠性。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂收集2015～2020年石河子大学医学院第一附属医院手术切除的口腔鳞状细胞癌癌旁正常组织标本40例，所有病例病理诊断明确。Olympus BX51图像分析仪；2.5 L高压锅；美的家用微波炉；SEMA3A抗体(1 ∶200，Abcam公司，Cambridge，UK)、SEMA3B抗体(1 ∶500，Abcam公司，Cambridge，UK)；……