杨宣涛，徐艳琼，杨 慧，王晚璞，郑青青，刘 涛

骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone, GCTB)系一种中间型骨肿瘤，组织学上由肿瘤性单核细胞和均匀分布的破骨细胞样巨细胞构成。但几乎所有的骨病变均可以有破骨样巨细胞，如非骨化性纤维瘤、软骨母细胞瘤、动脉瘤样骨囊肿等，这常常给准确诊断GCTB带来很大的干扰，尤其是较小组织的活组织检查，有时极具挑战性。近年来，随着RANKL抑制剂(denosumab)的应用，GCTB的治疗取得较好的疗效[1]，但同时治疗后的GCTB形态学特征与治疗前的差异可以较大，有时完全无破骨样巨细胞，若在无临床病史的情况下，诊断尤其困难。

H3.3由1号染色体上的H3F3A基因和17号染色体上的H3F3B基因共同编码，在许多肿瘤的发生、发展中扮演着重要角色。近年研究发现GCTB中存在H3F3A基因突变，90%以上为p.G34W突变，并且可以采用免疫组化法检测H3.3 G34W蛋白表达鉴别诊断GCTB[2-5]，但这类研究多以国外为主，国内仅有少量文献报道，且基因突变与蛋白阳性率多低于国外研究[6-8]。本实验采用荧光PCR-毛细管电泳测序法和免疫组化法探讨H3F3A基因突变和H3.3 G34W突变蛋白在GCTB中的表达及诊断意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集云南省第一人民医院2014年1月～2020年8月具有典型的影像学、组织学特点，且标本未经脱钙处理的GCTB 34例(其中原发性30例，复发性2例，经denosumab治疗后2例)，并收集其它富含破骨样巨细胞的肿瘤40例(其中软骨母细胞瘤10例，富于巨细胞骨肉瘤3例，甲状旁腺功能亢进2例，动脉瘤样骨囊肿10例，非骨化性纤维瘤15例)。所有病例均有完整的病历资料，样本来源包括穿刺活检、病灶刮出和局部手术切除组织。……