门 慧，谈 顺

胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤，转移是胃癌患者死亡的重要原因。探讨胃癌发生、发展相关的分子机制从而寻求有效的治疗手段是现阶段研究的重要任务[1-2]。肿瘤微环境是肿瘤细胞赖以生存的土壤，肿瘤侵袭、转移需要新生血管支持，而血管内皮细胞是血管形成的基础[3]。EGFL6属于EGF重复超级家族，是一种分泌蛋白，特征是EGF结构域重复，由于同时具有EGF结构域和MAM结构域，又被命名为MAEG，参与细胞周期、增殖及发育调节[4]。文献报道，EGFL6在多种肿瘤中表达上调，并促进肿瘤血管形成：如EGFL6促进乳腺癌侵袭、转移及血管形成[5]；EGFL6能促进卵巢癌[6]、结直肠癌[7-9]侵袭、转移；EGFL6在黑色素瘤[10-11]、鼻咽癌[12]、口腔鳞状细胞癌[13]、肺腺癌[14]中高表达；EGFL6促进斑马鱼胚胎血管形成[15]。迄今为止，EGFL6在胃癌微环境中的生物学作用尚未见报道。本文着重探讨EGFL6在胃癌血管生成中的作用，为临床肿瘤治疗提供新的分子治疗靶点。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂与仪器细胞株、胃癌组织均来自中南大学湘雅医学院附属海口医院，RPMI 1640培养基、胎牛血清购自BI生物公司，0.25%胰酶购自Life公司，EGFL6多克隆抗体购自Abcam公司，CD34抗体购自福州迈新公司，过表达质粒购自广州锐博公司，慢病毒上清自提，SDS-PAGE凝胶配制试剂盒及蛋白浓度测定试剂盒购自Bioword公司，5×SDS蛋白上样缓冲液、ECL化学发光液、全蛋白提取试剂盒购自凯基生物公司，电泳仪购自BAYGENE公司，低温高速离心机购自Thermo公司，蛋白浓度的酶标仪购自BIO-BRAD公司，分光光度计及低温离心机购自Thermo公司。Trizol试剂、逆转录试剂盒、荧光定量试剂购自TaKaRa公司，β-actin单克隆抗体购自北京中杉金桥公司。……