张 放 汪玲红 王祥云 黄 樱

（赣南医学院第一临床医学院，江西 赣州 341000）

0 引言

血管性痴呆（Vascular Dementia，VD）是可导致认知障碍的一类疾病，产生的机制主要有细胞焦亡（Pyroptosis）、中枢胆碱能系统的破坏、炎症反应、氧化应激损伤等[1]。其中，细胞焦亡与VD发病的关系渐受关注。研究表明，细胞焦亡的发生发展始于Caspase-1的激活，而Caspase-1的激活受NOD样受体（NLR）的调控。构成NLRs的关键成员：NOD样受体家族热蛋白结构域3（NLRP3），被认为是将血管疾病与神经炎症和脑部疾病紧密联系的枢纽，在其中发挥着重要作用[2]。

蛇床子素（Osthole）是一种呋喃香豆素，具有抑制抗氧自由基损伤、抗炎及改善记忆的作用[3，4]。既往发现，皮层组织中的NLRP3炎性体在慢性脑缺血的炎症反应中起着关键作用。本文从动物体内实验着手，探讨蛇床子素是否能通过抑制NLRP3炎性体激活而抵抗痴呆，进而深入探讨蛇床子素的机制作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选用洁净环境成长的雄性SD大鼠（重量150～180 g，n=30，赣南医学院SPF动物房供给的健康大鼠）。

1.2 药物、试剂和仪器

凝胶成像仪、电泳仪（Bio-Rad）；蛇床子素粉剂（成都埃法生物科技有限公司）；PCR仪（ABI）；NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18和β-actin（Abcam）。

1.3 实验动物造模、分组及给药

用改良的两侧颈总动脉永久性结扎术制备VD动物模型。随机将大鼠平均分为五组：假手术、VD模型、蛇床子素干预组（10，25，40 mg/kg）。鼠麻醉苏醒后向其腹腔注射药物，1天1次，共给药12周。其余组生理盐水同法等量给予。

1.4 Morris水迷宫测试

能够成功找到水中台子的规定时间是120 s。大鼠找到台子实际所需的时间是逃避潜伏期（EL）。

1.5 荧光实时定量PCR

总RNA用Trizol加至组织样本来提出，加逆转录试剂，反应体系为20μL，置于仪器中反应扩增。……