陈艳丹，岑瑞祥，曹 炜，龚国清，彭 聪

[鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)耳鼻咽喉头颈外科，湖北黄石 435000]

喉癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤，2014年我国喉癌发病2.34万例(男性2.08万例，女性0.26万例)，其中死亡1.32万例(男性1.15万例，女性0.17万例)[1]。由此可见，喉癌具有好发于男性、病死率高的特点。导致喉癌患者死亡的主要原因是局部复发和远处转移，目前对喉癌细胞远处侵袭转移的分子机制尚不清楚。基质金属蛋白酶家族(MMPs)被认为是细胞外基质形成、重塑、细胞分化及成型等的重要调控介质，与肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和血管形成密切相关[2]。高通量测序分析显示，基质金属蛋白酶1(MMP1)在喉癌组织中普遍高表达[3]，但其具体调控机制未明。CHEN等[4]报道miR-134靶向负调控MMP1和MMP3抑制骨肉瘤细胞的侵袭和转移，提示miR-134可能是MMP1表达的调控机制之一。因此，本研究探讨miR-134靶向MMP1对喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响，以期为喉癌的诊治提供新的分子靶点。

1 材料与方法

1.1 试剂及仪器

喉癌细胞系Hep-2和HEK293T细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心；RPMI-1640培养基、胎牛血清、1%青霉素-链霉素混合液(双抗)和胰蛋白酶购自美国Gibco公司；脂质体lipfectamine 2000(Lip2000)和TRIzol购自美国Invitrogen公司；CCK-8细胞增殖检测试剂盒购自日本同仁株式会社化学研究所；AnnexinⅤ-FITC/碘化丙锭(PI)双染细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司；Western blot全套试剂购自碧云天生物技术研究所；兔抗人MMP1单克隆抗体及鼠抗人GAPDH单克隆抗体(一抗)和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG(二抗)均购自英国Abcam公司；……