殷存芝，陈 慧，陈玉姣，杨在群，陈亚华

(遵义医科大学附属医院麻醉科，贵州遵义 563003)

恢复心肌的血供是挽救缺血性心脏病的关键治疗措施，但由此产生的心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)却严重影响了患者的治疗及预后。细胞凋亡是MIRI的特征之一，抗凋亡成为近年防治MIRI的重要措施[1]。右美托咪定是新型高选择性的α2肾上腺素受体激动剂，有研究表明其预处理可减轻大鼠MIRI，其机制与抑制细胞凋亡有关[2]。C-Jun氨基末端激酶(C-Jun N-terminal kinase,JNK)是丝裂原活化蛋白家族进化上高度保守的一员。研究表明JNK信号通路的激活可促进细胞凋亡[3]。本研究探讨右美托咪定预处理减轻离体大鼠MIRI的作用是否与抑制JNK信号通路的过度激活从而减轻细胞凋亡有关。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1主要试剂

右美托咪定购自江苏恒瑞医药有限公司；JNK抑制剂SP600125、JNK小鼠抗大鼠单克隆抗体、p-JNK小鼠抗大鼠单克隆抗体、GAPDH小鼠抗大鼠单克隆抗体、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)小鼠抗大鼠单克隆抗体、Goat荧光二抗购自美国Selleck公司；TTC购自北京百奥思科生物技术有限公司；原位细胞凋亡试剂盒购自美国Sigma公司。

1.1.2动物

SPF级健康雄性SD大鼠60只，8～10周，260～280 g,由重庆腾鑫生物技术有公司提供，动物许可证编号：SCXK(湘)2014-0011。

1.2 方法

1.2.1模型制备及分组

腹腔注射1%的戊巴比妥钠50 mg/kg麻醉大鼠后充分暴露心脏，迅速剪下并放置于95% O2及5% CO2预充并冷冻的4 ℃ K-H液中，轻轻挤压心脏排除瘀血。迅速悬挂并固定于Langendorff装置上，进行K-H液灌注，同时置入乳胶水囊至左心室，使左室舒张末期压力维持在4～7 mm Hg，移动保温杯使心脏处于恒温系统中。……