俞 弋，丛 青，徐丛剑，姜 伟

复旦大学附属妇产科医院妇科，上海 200011

卵巢癌是女性生殖系统中死亡率最高的一种恶性肿瘤。起病隐匿，缺乏早期有效的诊断方法，病理学类型复杂，预后较差［1］。目前卵巢癌的治疗方式仍是手术及术后辅助铂类药物为主的化疗，但易出现化疗耐药及转移复发［2］。炎症微环境对恶性肿瘤的发生、发展及转移至关重要。血小板活化因子（platelet-activating factor，PAF）作为迄今为止发现的内源性生物活性最强的一种磷脂类炎性因子，与PAF受体（PAF receptor，PAFR）结合后参与体内多种生理病理学过程［3-5］。

本课题组的前期研究［6］发现，PAFR在上皮性卵巢癌组织及细胞系中高表达，PAF能明显刺激PAFR阳性的卵巢癌细胞系增殖及侵袭。此外，在构建的裸鼠卵巢癌腹腔种植瘤模型中给予顺铂（cisplatin，CDDP）和（或）银杏内酯B（PAFR特异性拮抗剂），结果显示，银杏内酯B具有体内抑制卵巢癌的作用，并可增强肿瘤细胞对于CDDP的敏感性［7］。但相关机制尚不明确。本研究将在前期研究的基础上，探索CDDP作用后的卵巢癌细胞中PAFR的表达对卵巢癌细胞CDDP敏感性的影响，并探讨相关分子机制。

1 材料和方法

1.1 细胞系及主要试剂

浆液性卵巢癌细胞系SKOV-3和乳突状卵巢腺癌细胞系CAOV-3购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，CDDP、PAF和WEB2086（PAFR抑制剂）购自美国Sigma-Aldrich公司，兔抗人PAFR抗体购自美国Abcam公司，兔抗人phospho/total-ERK/AKT/P70S6K抗体购自美国Cell Signaling Technology公司。

1.2 蛋白质印迹法（Western blot）检测

收集各组细胞蛋白，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）分离细胞裂解物并转移至硝酸纤维素膜上。……