柳杨青， 汪艳芳

（河南省人民医院/郑州大学人民医院/河南大学人民医院 1编辑部，2内分泌科，河南郑州450003）

肌肉生长抑制素（myostatin，MSTN）是转化生长因子β 超家族成员之一，可显著抑制肌肉增生、肥大［1］。MSTN 除可负向调控骨骼肌质量外，在蛋白质、脂肪和糖代谢调节中也发挥重要作用。既往研究表明，2 型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）及胰岛素抵抗人群血清和骨骼肌中MSTN 水平升高［2］；T2DM 小鼠骨骼肌 MSTN 表达增加，接受 MSTN抗体注射后，空腹和餐后血糖水平降低［3］。推测MSTN可影响机体对葡萄糖的摄取和利用，参与胰岛素抵抗的发生。但迄今为止MSTN 参与调节T2DM胰岛素抵抗的分子机制尚不明确。本研究以MSTN基因敲除小鼠为基础，采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素注射构建T2DM 动物模型，探究MSTN基因对T2DM 小鼠胰岛素抵抗及骨骼肌胰岛素信号通路的影响，现报道如下。

材料和方法

1 材料

1.1 实验动物 采用CRISPR/Cas9 技术及高通量电转受精卵方式构建杂合型MSTN基因敲除（MSTN+/-）小鼠，通过繁育及PCR 鉴定获得纯合型MSTN基因敲除（MSTN-/-）小鼠 12 只，杂合型MSTN基因敲除（MSTN+/-）小鼠 12 只，野生型（wild type，WT）小鼠12只，品系C57BL/6N，6周龄，雄性，由赛业生物科技有限公司提供。小鼠饲养于河南大学医学院动物房［动物实验许可证号SYXK（豫）2016-0006］，室内温度22～24 ℃，湿度40%～60%，保持昼夜12 h 节律，自由进食饮水，适应性饲养1 周。本研究遵循动物伦理和实验准则。

1.2 主要仪器与试剂 抓力测定仪（上海欣软）；转棒式疲劳仪（安徽正华）；血糖仪（江苏鱼跃）；酶标仪（BioTeK）；脱水机、包埋机和病理切片机（武汉俊杰）；光学显微镜及成像系统（Nikon）；匀浆仪（Bio-Spec）；脱色摇床和电泳仪（北京六一）。……