戴婷婷，许婷，俞小卫

国内外统计数据显示，肺癌仍居恶性肿瘤发病率和死亡率的首位，疾病负担逐年上升［1-2］。近年来，随着靶向、免疫等治疗方案的不断更新和改进，肺癌患者的生存状况有了较大的改观，但其5年生存率仍居于末位［3］，寻找肺癌治疗的新方法是亟待解决的问题。基因治疗通过将目的基因转入体内获得稳定持久的表达，从而发挥治疗作用，有望成为肿瘤治疗的热点［4］。NK4作为一种新型抗肿瘤药物，不仅可以与肝细胞生长因子（HGF）竞争性结合细胞间质上皮转换因子（cellular-mesenchymal epithelial transition factor，c-Met），抑制HGF∕c-Met介导的肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移［5］，还可以通过直接抑制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）而抑制血管生成，在细胞生长调节、肿瘤治疗研究中具有重要的意义［6-7］。本研究在前期体外细胞水平的研究基础上，通过构建稳定的NK4过表达慢病毒载体，以瘤内注射的方式对裸鼠皮下移植瘤进行干预，进一步研究慢病毒载体介导的NK4基因过表达对人肺腺癌移植瘤生长的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 人肺腺癌A549细胞株由南京医科大学附属常州市第二人民医院中心实验室惠赠。RPMI-1640培养基、胎牛血清、胰蛋白酶购自美国Gibco公司。4～5周龄无特定病原体（SPF）级健康雌性BALB∕c裸鼠15只购自江苏科标医学检测有限公司，饲养于24℃、50%湿度，SPF级无菌环境中。重组慢病毒载体LV-NK4及阴性对照载体LV-con由上海吉凯基因化学技术公司构建。细胞裂解液、苯甲基磺酰氟（PMSF）和蛋白浓度测定试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司。……