陆 珊 胡晓霞 刘 珍

(1 右江民族医学院临床医学院，广西百色市 533000，电子邮箱：673869247@qq.com；2 广西壮族自治区人民医院妇科，南宁市 530021)

【提要】 人类ROBO与其配体SLIT家族的成员是肿瘤发生发展中的重要信号分子。近年来研究显示，SLIT/ROBO可作为促癌或抑癌因子参与多种肿瘤的发生、发展和转移等生物调控过程。SLIT/ROBO在宫颈癌组织中也有异常表达，且与启动子甲基化相关，具有促进宫颈癌细胞凋亡的作用。本文就SLIT/ROBO信号通路在肿瘤、宫颈癌中作用的研究进展进行综述。

宫颈癌是女性最常见的生殖器官癌症之一。据统计，宫颈癌的发病率和死亡率均在女性肿瘤中排名第四[1]。因此，研究宫颈癌的发生发展机制，寻找其辅助诊断的焦点及治疗的潜在靶点，对于提高患者生存率具有重要意义。SLITs(分泌型糖蛋白)是一个分泌蛋白家族，通过Roundabout(ROBO)受体发出信号，在发育过程中介导细胞与其环境之间的相互作用[2]。研究发现，SLIT/ROBO信号通路在恶性肿瘤细胞的生长中具有促进或抑制作用,在宫颈癌组织中也有异常表达，且与启动子甲基化相关，具有促进宫颈癌细胞凋亡的作用[3-6]。本文就SLIT/ ROBO信号通路的组成与功能、与肿瘤的关系、在宫颈癌中的作用进行综述。

1 SLIT/ROBO信号通路的组成与功能

SLITs包括SLIT1、SLIT2和SLIT3，其基因分别位于人类染色体10q24.1，4p15.3，5q34-35.1；ROBO受体包括ROBO1、ROBO2、ROBO3和ROBO4，ROBO1和ROBO2基因位于人类染色体3p12.3，ROBO3和ROBO4基因位于人类染色体11q24.2。ROBO受体的下游信号分子主要是细胞质激酶以及与肌动蛋白聚合、微管细胞骨架重组相关的调节分子，包括Hakai、Myo9b等，它们都有助于细胞的迁移[7]。蛋白质结构研究表明，SLIT蛋白通过第二个富含亮氨酸类受体激酶结构域与ROBO1的第一个免疫球蛋白结合来发挥调节血管生成，促进炎性细胞趋化、肿瘤细胞迁移和转移等作用[8]。ROBO2的细胞外免疫球蛋白4是二聚化结构域，可促进酶效应因子的募集和激活，从而促进细胞内信号传导[9]。ROBO3和ROBO4是两个独特的受体，具有很大的不确定性，尚不清楚其如何与SLIT配体结合来调节细胞活性[8，10-13]。SLIT与ROBO相互作用后，通过招募不同的衔接分子或蛋白质引发信号通路级联反应，在肌肉细胞形成、细胞迁移、干细胞生长、血管生成、器官发育和肿瘤形成中发挥重要作用[7]。

2 SLIT/ROBO信号通路与肿瘤的关系

2.1 SLIT/ROBO信号通路具有抑制肿瘤作用 Kong等[3]发现，与邻近的非肿瘤组织相比，肺癌组织中SLIT2的mRNA表达水平较低或无法检测，且SLIT2过表达显著抑制了肺癌细胞的迁移及裸鼠异种移植肿瘤的生长、侵袭和转移。Huang等[14]发现，与邻近的非癌组织相比，结直肠癌组织中SLIT2的mRNA表达水平降低,而ROBO1 mRNA表达水平没有明显差异；同时，他们观察到结直肠癌细胞中SLIT2基因启动子高度甲基化，并发现SLIT2能以ROBO1依赖性方式抑制结直肠癌细胞迁移。Bauer等[15]发现，SLIT2在口腔鳞癌组织中呈低表达,且证明了SLIT2对表达P-钙粘蛋白的口腔鳞癌细胞的抑癌作用是通过调节ROBO3的表达来实现的。还有研究显示，SLIT/ROBO信号通路在食管鳞癌[16]、乳腺癌[17]、卵巢癌[18]等肿瘤组织中表达下调，且SLIT/ROBO信号通路可作为抑癌基因抑制肿瘤的发生发展。由此看来，SLIT/ROBO信号通路在某些肿瘤组织及细胞中表达下调并有抑制肿瘤发生发展的作用。

2.2 SLIT/ROBO信号通路具有促肿瘤作用 Ma等[4]发现，与非复发子宫内膜癌患者相比，复发患者肿瘤组织中SLIT2和ROBOl的表达升高，这不仅可促进肿瘤血管生成，还与子宫内膜癌的预后因素如国际妇产科学联合会分期、分化程度、肌层浸润、血管浸润、淋巴结受累、组织学类型密切相关，因此认为SLIT2/ROBOl信号通路可能在肿瘤转移、复发中发挥作用。Zhao等[19]发现，骨肉瘤组织中SLIT2和ROBO1的表达上调，并且ROBO1的高表达与总体存活率降低相关；体外和体内实验证明，SLIT2/ROBO1信号通路可促进骨肉瘤细胞增殖，抑制其凋亡。Pircher等[20]发现，与良性前列腺组织相比，ROBO4及其配体SLIT2蛋白在前列腺癌组织中的表达明显升高，ROBO4和SLIT2高表达与前列腺癌的高级别病变有关，ROBO4过表达可促进前列腺癌细胞的增殖能力。研究显示，SLIT/ROBO信号通路在胃癌[21]、膀胱癌[22]等肿瘤组织中的表达上调，且可作为癌基因促进肿瘤的发生发展。综上，SLIT/ROBO信号通路在某些肿瘤组织和细胞中的表达上调，并表现为促肿瘤生长的作用。

3 SLIT/ROBO信号通路与宫颈癌的关系

3.1 宫颈癌中SLIT/ROBO信号通路的表达情况 有研究显示，SLIT2和ROBO1/2在宫颈癌组织及癌前病变组织中表达降低，并存在不同程度的缺失[5]。Narayan等[23]发现，SLIT和ROBO mRNA在宫颈癌组织和宫颈癌细胞中不表达或低表达。Singh等[24]发现，在正常宫颈组织、宫颈癌前病变组织、宫颈癌组织中，SLIT2 mRNA的表达水平依次降低；与正常宫颈组织相比，SLIT2蛋白在宫颈病变组织中表达降低。由此可见，宫颈癌组织中SLIT/ROBO呈低表达状态。

3.2 宫颈癌中SLIT/ROBO信号通路表达与甲基化的关系 Narayan等[23]检测了浸润性宫颈癌组织及癌前病变组织中SLIT/ROBO基因的启动子甲基化情况,发现高频率的启动子甲基化导致侵袭性宫颈癌组织中SLIT/ROBO基因表达下调；通过对宫颈癌前病变组织的分析，进一步证明SLIT/ROBO通路的启动子高甲基化发生在肿瘤进展的早期；SLIT2基因的甲基化频率在正常宫颈组织、宫颈癌前病变组织、宫颈癌组织样本中依次增高，提示SLIT2基因的甲基化可能在宫颈癌的发生、发展中起重要作用。Mitra等[5]发现，在宫颈上皮内瘤变组织、早期浸润性宫颈癌组织中，SLIT/ROBO表达下调且存在启动子甲基化；通过对宫颈癌SiHa细胞和HeLa细胞进行去甲基化实验，验证了启动子甲基化是宫颈癌中SLIT2和ROBO1/2的失活机制之一。在Narayan等[23]发现浸润性宫颈癌中SLIT/ROBO的表达下调、启动子区域存在高度甲基化基础上，袁立芹等[25]发现，高级别病变宫颈组织中SLIT2基因甲基化水平明显高于低级别病变和正常宫颈组织，且检测SLIT2基因的甲基化水平能够有效诊断高级别宫颈病变。上述研究说明，SLIT/ROBO信号通路在宫颈癌中的低表达与其甲基化相关。

3.3 SLIT/ROBO信号通路与宫颈癌细胞功能 SLIT/ROBO信号通路具有促进宫颈癌细胞凋亡的作用。黄小莉等[6]发现，SLIT2/ROBO1 mRNA及蛋白的表达水平在正常宫颈上皮组织、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞癌组织中呈逐渐下降的趋势；过表达ROBO1或沉默SLIT2后的宫颈癌HeLa细胞在体外凋亡能力较未经处理的宫颈癌HeLa细胞明显升高或降低，提示SLIT2/ROBO1能促进宫颈癌细胞凋亡。目前，SLIT/ROBO信号通路对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用研究较少，还有待进一步研究。

4 结 语

SLIT/ROBO信号通路在不同肿瘤组织中表达情况不一致，且对恶性肿瘤细胞既有促进作用又有抑制作用。SLIT/ROBO信号通路在宫颈癌组织中呈低表达，其低表达与异常甲基化有关；SLIT/ROBO能促进宫颈癌细胞凋亡。目前，SLIT/ROBO信号通路在宫颈癌中的研究较少，对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用有待研究。随着对SLIT/ROBO的进一步研究，SLIT/ROBO信号通路有可能成为预防和治疗宫颈癌的潜在靶标。