俞露，王莹，张宇，刘莹，刘景会，刘玉林

长春生物制品研究所有限责任公司细胞因子室，吉林长春 130012

白细胞介素-1 受体拮抗剂（interleukin-1 receptor antagonist，IL-1Ra）是人体内一种天然的蛋白质分子，为IL-1 家族成员，本身无激动剂的作用，但能与IL-1 特异性结合，从而拮抗IL-1 介导的各种炎症效应［1-2］。由于人体内天然的IL-1Ra 含量较少，而临床研究表明，患者病灶处分泌的IL-1 需大量的IL-1Ra才能有效抑制［3］，众多研究者将应用基因工程技术表达该药物作为研究方向。目前上市的产品只有Sobi公司的Kineret，中文名称为阿那白滞素，广泛应用于炎症反应的治疗，对痛风、类风湿性关节炎等疾病效果显著，且无药典及专利等参考资料，因此，对于该药物工艺及质量分析方法的研究依然是热点。

生物学活性是反映生物制品有效性的关键质量属性。本实验依据IL-1Ra 可中和重组人IL-1β 对人黑色素瘤细胞A375. S2 的杀伤抑制作用，活细胞内脱氢酶类可将MTS 转化为液态可溶性橙色甲臜化合物［4-5］，后者产量与活细胞数和细胞活力呈正比，反应完成后测定其在波长490 nm 处的吸光度［6-9］，可得到重组人IL-1Ra 浓度对吸光度值的效应曲线，从而建立IL-1Ra 体外生物学活性检测方法，并对方法进行验证。

1 材料与方法

1. 1 样品 Kineret 为安进公司产品；IL-1Ra 原液（批号为S20191004、S20200401、S20200402、S20200-403）及成品（批号为S20190303、S20200201、S2020-0702、S20200803）为长春生物制品研究所有限责任公司制备。

1. 2 细胞 人黑色素瘤A375. S2 细胞系由上海百迈博制药有限公司惠赠（ATCC®Number：CRL-1872TM）。

1. 3 主要试剂及仪器 活性标准品为安进公司原研药（批号：3529201A，比活性：1 × 105U ／ mg）；IL-1α和IL-1β 购自美国R&D 公司；DMEM 和RPMI1640培养基购自美国Gibco 公司；……