崔同，吴奇剑，刘春香，廉洪宇，赵雪，李子涛，张怡

1. 牡丹江医学院附属红旗医院，黑龙江牡丹江 157000；2. 杭州萧山傅氏骨伤科医院，浙江杭州 311254；3. 天晴干细胞股份有限公司，黑龙江哈尔滨 150028

血小板裂解液（platelet lysate，PL）是先通过超滤离心从全血中分离富血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP），再用冻融的方式将血小板裂解而制备的液态衍生物［1］，其去除了残余固态细胞成分，同时降低了免疫原性，保留了其中多种生长因子，如胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor，IGF）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、血小板衍生生长因子（platelet derived growth factor，PDGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、骨形成蛋白2，4，6 及白细胞介素-1 等［2-3］。有研究显示，PL 能有效替代胎牛血清（fetal bovine serum，FBS），在体外扩增培养成纤维细胞、内皮细胞及间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）［4-6］。

WILTFANG 等［7］在对严重骨缺损的愈合影响研究中发现，PRP 对于骨再生有显著影响。PL 作为PRP 的进一步裂解产物，也具有促进骨再生和修复的作用［8］，除了用于MSCs 扩增培养之外，还具有促进组织修复、免疫调节等作用［9-10］。

超活化血小板裂解液（super-activated platelet lysate，sPL）是通过用CaCl2结合肝素激活PRP 中的血小板，冻融裂解血小板的同时用温度浮动控制方法去除纤维蛋白原获得的［11］，制备过程中彻底去除了血小板膜、细胞碎片等溶液中的微小产物，比既往的PRP 及PL 中的血小板激活更彻底，保留了更高纯度生物活性因子，使其不仅富含营养因子和生长因子，能够改善局部微环境，刺激病灶区域功能性细胞的增殖潜能，还能激活损伤部位的干细胞，使其分化成损伤部位的成体细胞，促进骨骼及软骨再生与修复。

本实验旨在探讨不同浓度sPL 对成骨细胞增殖的影响及凋亡修复作用，以明确其能否有效应用于骨组织愈合。……