赵彩红，王美皓，李自良，靳冬武，马花，马忠仁，，乔自林，陈宏，张家友，王家敏

1. 西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心，甘肃兰州 730030；2. 西北民族大学生命科学与工程学院，甘肃兰州 730030；3. 兰州百灵生物技术有限公司，甘肃兰州 730010；4. 吉林冠界生物技术有限公司，吉林梅河口 135000；5. 武汉生物制品研究所有限责任公司，湖北武汉 430000

哺乳动物细胞系可广泛应用于重组蛋白、单克隆抗体以及疫苗等生物制品的生产［1-2］。MDCK 传代细胞系作为生产流感疫苗最为常用的细胞基质，在过去几十年已进行了详细的研究［3-4］。已建立的MDCK 细胞系为贴壁培养型细胞［5］，在企业生产中可借助微载体、片状载体或细胞工厂等媒介进行规模化培养，这不仅增加了生产成本，更不利于工业生产的便捷操作［6-9］。随着新兴培养基的开发以及新细胞系的研究，MDCK 悬浮细胞已投入研究及工业生产中［10-14］。悬浮培养方式不仅较贴壁培养节省了生产成本，大大减少了人力物力，降低了外源污染的风险，还减少了产品的批间差异，简化了下游的纯化工艺［15］。但这些上述报道的MDCK 悬浮细胞系在相应的培养基中比生长速率、生长密度以及对病毒的敏感性均较低，因此，仍在开发高密度、快速生长且对病毒较敏感的MDCK 悬浮细胞。另外，细胞在实验室阶段的高密度生长与工业生产不一定存在线性关系，尤其是对剪切力更为敏感的悬浮细胞系。

本研究旨在将MDCK 贴壁细胞驯化为无血清培养的悬浮细胞系，验证其对流感病毒的敏感性，并进一步探讨该细胞逐步扩大工业化生产的可行性，以期建立1 株能在生物反应器中高密度、快速生长且易感的MDCK 细胞系。……