莫超越,杨珍琳

1.广西壮族自治区梧州市中医医院检验科，广西梧州 543002；2.广西壮族自治区梧州市长洲区兴龙社区卫生服务中心，广西梧州 543002

α-珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)是由于α珠蛋白基因的缺失或功能缺陷(点突变)而导致α珠蛋白链合成障碍所引起的一组遗传性溶血性疾病[1]。广西是α-地贫的高发区，为了解梧州市新生儿α-地贫的发生率，笔者选取梧州市中医医院2018年8月至2019年8月出生的新生儿进行脐带血血红蛋白(Hb)电泳，将出现Hb Bart′s带的标本视为α-地贫标本，与无Hb Bart′s带的标本进行红细胞相关参数的比较，分析各指标的差异。因Hb、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、红细胞计数(RBC)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)等脐带血参数在α-地贫的筛查中已有相关报道，但较少有红细胞计数与血红蛋白比值(RBC/Hb)、红细胞计数与红细胞平均体积比值(RBC/MCV)的相关报道，故本研究将其作为主要研究对象，并与既往文献报道中关于筛查α-地贫有效的静脉血参数进行比较，挖掘其诊断α-地贫的最佳临界值，为本地区应用新生儿脐带血诊断α-地贫寻找一些经济、快捷、准确的指标，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年8月至2019年8月在梧州市中医医院出生的696例新生儿(男367例，女329例)，将脐带血进行Hb电泳，把检出的72例Hb Bart′s阳性标本纳入Hb Bart′s阳性组，将无Hb Bart′s带的标本作为电泳正常组(624例)。所选的新生儿经产科医师检查，排除心、肺、肝、肾、脑等疾病，无肿瘤及感染性疾病。

1.2仪器与试剂 采用Sysmex XT-4000i及配套试剂对抗凝脐带血进行血液学分析；采用美国Helena SPIFE3000全自动电泳仪及配套的试剂、琼脂板、扫描系统进行脐带血电泳分析。

1.3方法 EDTA-K2抗凝管取2 mL脐带血混匀送检，以3 000 r/min离心5 min，吸100 μL红细胞加入5 mL生理盐水中充分混匀、洗涤，离心8 min，吸走上清液，加270 μL蒸馏水，充分振荡溶血，用四氯化碳抽提Hb后离心，取上层Hb液17 μL到点样槽，按仪器设定程序和操作步骤进行点样、电泳、染色、脱色、烘干、胶片扫描、结果分析。

1.4诊断标准[2]以脐带血Hb电泳出现Hb Bart′s带为新生儿α-地贫的诊断标准，根据Hb Bart′s含量分为4个类型：(1)静止型，1%～<3%；(2)标准型，3%～<20%；(3)中间型，20%～40%；(4)重型(又称Hb Bart′s胎儿水肿综合征)，>80%。

2 结 果

2.1脐带血Hb Bart′s阳性率统计分析 2018年8月至2019年8月696例脐带血标本中共检出Hb Bart′s阳性标本72份，阳性率为10.34%。其中静止型14例，阳性率为2.01%；标准型57例，阳性率为8.19%；中间型1例，阳性率为0.14%。α-地贫各类型中以标准型为主，占79.17%，静止型占19.44%，中间型占1.39%。

2.2各型α-地贫男女发生率比较 696例脐带血标本检出情况：静止型中男性检出8例，占1.15%(8/696)，女性检出6例，占0.86%(6/696)；标准型中男性检出35例，占5.03%(35/696)，女性检出22例，占3.16%(22/696)；中间型1例为男性，占0.14%(1/696)。

2.3男女性α-地贫的发生率比较 696例采集脐带血的新生儿中男367例，女329例。男性中检出正常323例，α-地贫44例；女性中检出正常301例，α-地贫28例。男女性α-地贫的发生率比较，差异无统计学意义(χ2=2.26，P>0.05)。

2.4Hb Bart′s阳性组与电泳正常组红细胞相关参数比较 Hb Bart′s阳性组新生儿脐带血RBC、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV水平高于电泳正常组，而Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD水平低于电泳正常组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 Hb Bart′s阳性组与电泳正常组红细胞相关参数比较

组别nRDW-SD(fL)RDW-CV(%)RBC/HbRBC/MCVHb Bart's阳性组7254.1±5.6 17.8±1.73.60±0.335.56±1.10电泳正常组 62462.2±5.816.7±2.92.91±0.164.18±0.61t-11.375 3.265 29.77516.578P0.0010.0010.0010.001

2.5Hb Bart′s阳性组不同性别间红细胞相关参数比较 各参数间的性别差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 Hb Bart′s阳性组不同性别间红细胞相关参数比较

项目nRDW-SD(fL)RDW-CV(%)RBC/HbRBC/MCV男4454.4±6.317.8±2.0 3.60±0.33 5.58±0.98女2853.7±4.417.8±1.2 3.56±0.345.43±1.13t 0.506 -0.1450.8290.342P0.6150.8850.410 0.560

2.6红细胞相关参数诊断α-地贫的效能评价 MCH、RBC/Hb、MCV、RDW-SD、RBC/MCV、MCHC的曲线下面积(AUC)分别是0.954、0.952、0.946、0.888、0.862、0.850，而RBC、Hb、RDW-CV分别为0.737、0.764、0.754，均小于0.800。部分结果见表3。分析RBC/Hb、RBC/MCV两个参数的约登指数，得到两个参数的诊断临界值、灵敏度和特异度，当RBC/MCV为4.741 8时，其诊断α-地贫的灵敏度为79.2%，特异度为84.8%，RBC/Hb为3.201 3时，其诊断α-地贫的灵敏度为86.1%,特异度为96.3%。

表3 部分红细胞相关参数诊断α-地贫的效能

3 讨 论

α-地贫是α珠蛋白基因缺失或点突变导致血红蛋白中1种或1种以上珠蛋白链合成缺失或不足所导致的贫血[3]。α珠蛋白基因位于16号染色体短臂上，健康者可自父母双方继承2个α珠蛋白基因合成足量的α珠蛋白链，若遗传了父母中有缺陷的α珠蛋白基因，则根据α珠蛋白基因缺失数目及点突变的不同，临床上把α-地贫分成静止型、标准型、中间型、重型4种类型[4]。其中静止型α-地贫是由于缺失1个α珠蛋白基因或者点突变而造成Hb组分合成异常，因其一般无明显的临床症状而易被忽视；标准型α-地贫则是因为有2个α珠蛋白基因缺失或点突变导致，一般情况下也无明显临床表现，部分患者可能出现轻度溶血症状，也易被忽视；中间型则是由3个α珠蛋白基因缺失或点突变引起，可因出现慢性溶血性贫血症状而受到关注；重型则是由4个α珠蛋白基因缺失或点突变引起，主要表现为新生儿在胎儿期不能合成正常的胎儿血红蛋白(HbF)而导致全身水肿、肝脾肿大、腹部膨隆、四肢短小，大部分胎儿在宫内死亡或出生后1～2 h内死亡。

Hb Bart′s是新生儿脐带血中特殊的Hb，是α-地贫患者胎儿期的一个重要特征，也是国际公认的诊断α-地贫简便、有效的指标[5]。Hb Bart′s作为α-地贫基因携带者的早期筛查指标，能有效检出α-地贫患儿[6]。在新生儿脐带血中，不同类型的α-地贫可检测到不同含量的 Hb Bart′s[7]。

本研究检出Hb Bart′s阳性标本72例，阳性率为10.34%，比广西其他地区α-地贫人群携带率(14.95%)[8-9]低。72例α-地贫新生儿中男44例，女28例，男女间α-地贫的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。本地区α-地贫以标准型为主，占79.17%，静止型占19.44%，中间型占1.39%，也提示了本地区α-地贫的类型主要为标准型和静止型，与百色地区结果相同[10]。由于在半岁后α-地贫中的静止型和部分标准型患儿其临床表现与健康人无明显差异，在基层地区，婚育时容易漏掉这部分人群，加大了下一代地贫患儿的出生风险。

成人静脉血红细胞相关参数MCV、MCH用于α-地贫的筛查及与α-地贫基因的相关性已有报道[8]，脐带血MCV、MCH、MCHC应用于诊断新生儿α-地贫也有研究报道[11]。本研究结果显示，Hb Bart′s阳性组新生儿脐带血RBC、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV高于电泳正常组，而Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD低于电泳正常组，差异均有统计学意义(P<0.05)，与文献[12]报道结果相符。这说明α-地贫患儿在胎儿期即表现为小细胞低色素性贫血，脐带血红细胞相关参数可作为筛查α-地贫的有效指标。本研究还发现Hb Bart′s阳性组脐带血红细胞参数在性别间的差异无统计学意义(P>0.05)。由于各参数的应用价值不同，本研究通过ROC曲线评估其诊断效能：MCH>RBC/Hb>MCV>RDW-SD>RBC/MCV>MCHC，以上参数的AUC均大于0.800，有较高的应用价值。而MCH的诊断效能优于MCV，与文献[13-14]报道一致。建议临床在筛查诊断α-地贫时按诊断效能高低选择相关参数作为判断依据，提高诊断的准确度。

本研究发现，RBC/Hb、RBC/MCV有较高的应用价值，有研究报道RBC/MCV>5.9用于筛查成人α-地贫的灵敏度为95.0%,特异度为91.0%，MCV/RBC应用于诊断α-地贫的灵敏度为91.67%，特异度为90.09%[15-16]，说明这两个指标用于诊断α-地贫较为理想。由于新生儿脐带血的MCV大于成人，因此RBC/MCV>5.9不适宜用于新生儿α-地贫筛查。笔者进一步研究发现，脐带血RBC/MCV为4.741 8时，其诊断α-地贫的灵敏度为79.2%,特异度为84.8%，RBC/Hb为3.201 3时，其诊断α-地贫的灵敏度为86.1%,特异度为96.3%，是较理想的指标。究其原因可能是因为α-地贫患儿红细胞利用铁发生障碍,原卟啉与铁结合受到阻碍,引起小细胞低色素性贫血,MCV降低，而另一方面由于珠蛋白链合成异常导致Hb下降,机体促红细胞生成素生成增加而促使红细胞代偿性增多,导致RBC结果与Hb、MCV相背离。

综上所述，以脐带血红细胞相关参数作为α-地贫的筛查指标，具有准确、经济、便捷的特点，有利于各级医疗单位，尤其是基层单位开展地贫的防治工作，能及早地为α-地贫基因携带患儿立卡建档，降低α-地贫基因携带者成年后相互婚配导致重症地贫患儿出生的概率，对优生优育及提高人口质量具有重要意义。