刘倩 杨伏猛 徐同道 丁群 赵长新 梁伟

1江苏省连云港市第二人民医院检验科 222006；2江苏省连云港市第二人民医院内分泌科 222006

糖化血清蛋白（glycated serum protein，GSP）是血糖与血浆蛋白（其中约70%是白蛋白）之间非酶促反应的产物，也被称为果糖胺［1］。GSP 是反映近2～3 周内人体血糖控制情况的重要指标，临床上主要用于评价糖尿病患者血糖短期内的平均控制情况，并为临床治疗方案的制定和调整提供指导［2］。在某些特殊情况下，如接受血液透析的中晚期肾病患者、糖尿病合并妊娠患者等，GSP 较糖化血红蛋白能够更早反映短期内血糖变化，进而可以更快地对临床治疗做出反应［3］。

国家卫生健康委自2012 年先后发布了WS/T 404《临床常用生化检验项目参考区间》等行业标准文件［4-7］，为实验室参考区间的引用提供了重要依据。但截至目前，未见关于GSP 参考区间的行业标准文件，实验室所引用GSP 的参考区间多来源于试剂厂商提供的说明书，但由于人群分布、地域特点等差异，其适宜性有待进一步评价。本实验室所用的试剂盒为重庆中元公司所提供，其说明书提供的参考区间为1.40～2.95 mmol/L，我们通过Lis 系统回顾性分析和验证后发现，该参考区间范围过于宽泛，尤其是参考区间的上限过高，不适宜本地区人群使用。基于上述情况，本研究通过收集本区域健康人群的体检样本，检测并分析血清中GSP 的分布情况，旨在建立连云港地区20～79 岁健康成人血清GSP 的参考区间，进而充分发挥该指标的临床应用价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2020年5月至6月于连云港市第二人民医院体检中心的健康体检者1 154 例，男556 例，女598 例，年龄 20～79 岁。纳入标准：⑴年龄 20～79 岁，体质量指数18.5～28.0 kg/m2，血压正常；⑵血清生化常规指标均正常（如肝功能、肾功能、血脂等项目）；⑶尿液蛋白质、隐血均为阴性；⑷各项传染病指标（如乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒螺旋体）均为阴性。排除标准：⑴患有肝、肾、心功能不全等疾病；⑵处于妊娠期的女性；⑶近1 个月内使用过影响糖代谢的药物，如糖皮质激素、甲状腺激素等；⑷近半年内有手术史者；⑸个人基本信息、既往史等填写不全者。依据临床实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）C28-A3［8］推荐要求和世界卫生组织年龄划分标准，根据性别将受试对象分为男性组、女性组；再依据年龄分为青年组（20～44 岁）、中年组（45～59 岁）和老年组（60～79岁）。根据各组人群血清GSP检测结果的分布情况差异是否有统计学意义，确定分组或合并建立其参考区间。本研究经连云港市第二人民医院伦理学委员会审批通过，且受试者均知情同意。

1.2 标本采集 嘱受试对象于采血前3 d 正常饮食、活动，采集其空腹静脉血5 ml（不添加抗凝剂的血清管），静置30 min待标本凝固后，置于离心机中进行离心处理（离心半径 8 cm，3 000 r/min 离心 10 min），并将血清分装于EP 管中储存于-80 ℃冰箱，于规定时间内进行集中标本测定。同时，嘱受试对象留取新鲜晨尿10 ml，并于2 h 内完成尿液常规项目的检测。

1.3 仪器与试剂 生化检测采用贝克曼AU5821 全自动生化分析仪（美国贝克曼公司）；GSP 检测试剂盒（重庆中元公司，批号200502），测定方法为四氮唑蓝显色法。UN2000全自动尿液分析仪（日本希森美康公司），且尿液常规试剂为原装配套产品。所有样本在分析前，仪器均依据仪器标准操作规程进行定期维护和保养，确保检测系统处于良好状态，且所检测的项目室内质控均在控，室间质量评价均为合格。

1.4 统计学分析 全部数据应用SPSS 19.0 软件进行统计学分析。计量资料应用Kolmogorov-Smirnov 检验进行正态性分析，P＜0.05表示数据呈偏态分布。两组间比较采用Mann-WhitneyU检验，多组间比较采用Kruskal-WallisH检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。非正态分布资料以中位数和第25、75 百分位数［M（P25，P75）］表示，并以百分位数表示参考区间（P2.5～P97.5）。

2 结 果

2.1 健康成人血清GSP 检测结果分布情况Kolmogorov-Smirnov 检验显示：健康成人血清GSP 检测结果呈偏态分布（Z=0.044，P＜0.001），其分布情况见图1。

图1 1 154例健康体检者血清GSP的浓度分布直方图

2.2 不同性别研究对象血清GSP 检测结果 本研究显示：健康成人血清GSP 的浓度存在性别方面的差异，健康成年男性（20～79 岁）GSP 水平显著高于女性（20～79 岁）［2.15（2.06，2.27）mmol/L 比 2.03（1.95 ～2.14）mmol/L，Z=-11.602，P＜0.001］。

2.3 各年龄组研究对象血清GSP 检测结果 本研究显示：健康成年男性血清GSP 浓度在青年组、中年组和老年组之间差异无统计学意义（P=0.14）；健康成年女性血清GSP 浓度在青年组、中年组和老年组之间差异无统计学意义（P=0.07）。因此，健康成人血清中GSP 的分布与年龄之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 各年龄组健康体检者血清GSP检测结果

2.4 健康成人血清GSP 参考区间的建立 上述研究结果显示：健康成人血清GSP 的分布仅存在性别上的差异，故合并年龄组分别建立男性和女性血清GSP 的参考区间。由于健康成人血清GSP 浓度呈偏态分布，故根据CLSI C28-A3文件［8］和我国卫生行业标准《临床实验室检验项目参考区间的制定》［9］的建议，取双侧95%（P2.5～P97.5）建立了健康成人血清GSP 的参考区间。因此，本研究采用四氮唑蓝显色法建立的本地区健康成人血清GSP 参考区间分别为：男性（20～79 岁）1.86～2.52 mmol/L，女性（20～79 岁）1.78～2.37 mmol/L。见表2。

表2 1 154例健康体检者血清GSP检测结果分布情况（mmol/L）

3 讨 论

临床检验项目的参考区间作为实验室报告单的重要组成部分，是临床医生判断患者结果是否正常的客观指标，更是实施临床决策的辅助依据。因此，实验室项目的参考区间意义重大，如果项目没有参考区间或所使用的参考区间不适合，该项目则失去了检测的意义和临床价值［10-11］。然而，参考区间的建立受限于实验室自身条件、标本来源、受试对象的纳入标准、成本支出等因素的影响，在一定程度上限制了实验室自建各项目的参考区间［10-11］。国内实验室普遍的做法是验证并引用现有的参考区间，如卫生行业标准、《临床检验操作规程》、试剂说明书等［12-13］，但由于参考区间与人群分布特征、地域特点、饮食习惯等因素密切相关，因此实验室非常有必要自建各项目的参考区间。本实验结合连云港地区人群分布特点、饮食习惯和检测系统特性，进行了20～79 岁健康成人血清GSP 参考区间的研究，以期为与糖代谢相关疾病的辅助诊断、治疗情况监测、预后评估等方面提供重要的指导价值。

本研究通过建立的纳入标准与排除标准进行了受试对象的筛选，一共有1 154 例研究对象纳入本实验进行研究。本研究结果显示：本地区健康成年人血清GSP 的浓度水平呈偏态分布，并呈现出明显的性别上的差异，且健康成年男性的血清GSP 浓度明显高于女性。Pedrosa 等［14］针对466例巴西人进行了GSP 参考区间的研究，结果显示：健康成人的血清GSP 浓度存在明显的性别差异，且男性血清GSP 浓度明显高于女性，其采用的检测方法与我们的方法一致，且研究结果与本研究也保持一致。Kohzuma 等［15］针对美国人群进行了这方面的研究，其研究未发现健康成人血清GSP 浓度存在性别上的差异。该研究结果与本研究存有差异，经分析其原因可能为：人群分布特征存在一定差异；GSP 检测方法不同，本研究采用的是色原法，而Kohzuma 等［15］采用的检测方法是酶法。在此基础上，我们又根据年龄区间进行了数据的分组统计，且结果显示：本地区健康成人血清GSP浓度在年龄方面差异无统计学意义（P＞0.05），且浓度水平与年龄之间并无趋势性变化。Chen 等［16］针对北京地区人群特点建立了GSP参考区间，该研究认为：65岁以上人群血清GSP 水平显著高于65岁以下人群，但是20～45岁健康成人与46～65 岁健康成人之间的血清GSP 水平差异无统计学意义（P＞0.05）。此外，国内学者肖光军等［17］针对GSP 参考区间的建立进行了大样本研究，该研究将14 639 例健康成年人作为研究对象，其研究显示：四川省遂宁地区健康成年人的血浆GSP 浓度在年龄方面差异无统计学意义（P＞0.05），其研究结果与我们的结果较为一致。结合既往研究与本研究结果充分显示：健康成人血清GSP 的浓度变化与人群分布特征具有潜在的关联性，同时证实了实验室自建参考区间的必要性和重要性。

因此，本研究依据CLSI C28-A3 文件指南和卫生行业标准《临床实验室检验项目参考区间的制定》建议的方法初步建立了连云港地区健康成人的血清GSP 参考区间：男性（20～79 岁）1.86～2.52 mmol/L，女性（20～79 岁）1.78～2.37 mmol/L。肖光军等［17］建立的四川遂宁地区的健康成人GSP 参考区间分别为男性1.4～2.0 mmol/L、女性1.5～2.0 mmol/L，该参考区间明显低于本研究建立的参考区间，其可能的原因为：⑴地域特征存在差异；⑵人群分布特征存在差异；⑶生活饮食习惯存有潜在的差异。

综上所述，本研究基于实验室检测系统和区域人群特征初步建立了健康成人GSP血清参考区间，通过与试剂厂商提供的参考区间比较，证实了实验室自建参考区间的必要性，如果我们采用了试剂说明书中GSP的参考区间，势必会导致阳性结果的误判，甚至给临床决策的实施造成不良的影响。因此，临床检验指标的参考区间是度量结果正常与否的重要尺子，实验室应根据自身所具备的条件，建立适合区域人群的生物参考区间，以充分发挥该指标的临床价值。

利益冲突：作者已申明文章无相关利益冲突。