刘莹 程立 张博

（南方科技大学生物医学工程系，深圳 518055）

肿瘤、出生缺陷和自身免疫缺陷型疾病是全世界都面临的难题，且这类疾病的致死率极高，严重威胁国民生命健康［1-2］。目前针对这类疾病还缺乏行之有效的治疗手段，因此对这类疾病的早期检测意义非凡。但目前可用的早期检测方法十分局限：有创检测方法［3-4］检测率虽高但操作复杂且有较大副作用，一些生物标记物［5-6］的检测虽操作简单但准确率不高，因此建立一种无创、快速、准确的早期检测方法，对于提前检测这类疾病，降低其死亡率、提高公众健康水平具有重要的意义。

游离核酸（cell free DNA，cfDNA）最初是在人体外周血中发现，在过去的几十年中从尿液、脑脊液和胸膜液中也提取出了cfDNA［7-10］。基于游离核酸的液体活检技术因其无创性极大地减轻了患者检测过程中的痛苦和风险，其结果分析基于核酸的测序技术，因此分析结果精准且信息全面有说服力。与之相比，基于CRISPR-Cas系统［11］等检测技术成本较高，只能针对单一序列进行检测和分析，通量低且难以实现全面的检测；而基于血清标志物［12］的检测方法虽操作简单，但仅对部分遗传病有效，限制了其应用范围，且血清标志物检测的特异性有一定局限性。经大量研究证明，来源于胎儿、肿瘤组织的cfDNA极大地促进了无创产前诊断和液体活检领域及其他潜在应用的发展［2，13-14］。

人体外周血中存在着不同片段大小的cfDNA，cfDNA不仅是检测人体内肿瘤、胎儿发育情况和自身免疫缺陷疾病等重要的生物分子目标，更能够提供供体基因组的相关信息，对于疾病的检测分析有着重要意义［15-18］。……