假体周围感染兔模型中D-二聚体的动态表达与感染时间和种植细菌量的相关性研究
2021-11-15吴波文蔡伟良刘欢欢刘银李洁朱宝玉曾伟
吴波文 蔡伟良 刘欢欢 刘银 李洁 朱宝玉 曾伟△
假体周围感染(Prosthetic Joint Infections,PJI)是全关节置换术中最严重的并发症之一[1],因其难以诊断导致2年发病率达1%~2%[2-3]。因此,须寻找更敏感的PJI早期诊断指标。红细胞沉降率(Erythrocyte Sedimentation Rate,ESR)、C-反应蛋白(C-reactive Protein,CRP)和白细胞数(White Blood Cell Count,WBC)已用于PJI诊断,但这些血清指标的检测尚缺乏敏感性和特异性。D-二聚体是体内严重感染的关键指标[4-6],与PJI的关系尚不清楚。因此本研究建立PJI兔模型,监测D-二聚体的表达变化,明确其在PJI早期诊断中的价值。
1 实验动物与方法
1.1 材料与试剂
金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus,MSSA)购买于美国菌种保藏中心(American Type Culture Collection,ATCC,目录号35521),并在本实验室保存。无特定病原(Specified Pathogen Free,SPF)级新西兰大白兔(成年,雄性,体质量(5.84±0.91)kg)购于湖南省实验动物中心。CRP、ESR、WBC试剂盒以及D-二聚体检测ELISA试剂盒均购于上海碧云天生物科技有限公司。
1.2 动物模型和分组
本研究的动物实验方案已由本院伦理委员会审批通过(审批号2020031107),依照当前人初次人工髋关节置换多为生物型,通过3D打印技术制作兔生物型解剖型人工股骨头。构建假体周围感染动物模型:将注射生理盐水(MSSA含量为0)作为对照设为MSSA-A组,将MSSA分别以0.5×104,0.5×105,0.5×106cfu/mL浓度1 mL菌液注入关节腔,分别按顺序设为MSSA-B、MSSA-C、MSSA-D组,各10只。围手术期不用抗生素,术后兔分笼喂养,肢体不制动,随意活动。术后2周处死动物。选取体型大小基本一致日本大白兔40只,随机抽选3只完成计算机化X射线体层照相术(Computerized Tomography,CT)三维重建,通过计算机设计,3D打印人工股骨头,制作生物型解剖型人工股骨头及髓腔锉等手术工具;人工股骨头仿当前临床常用假体,将钴-铬-钼合金的烧结多孔涂层烧结于钛合金假体上。……
