何智军 何伟 洪志楠 李子褀 魏秋实 陈晓俊 颜新昊

临床上股骨头坏死(Osteonecrosis of Femoral Head，ONFH)与过度使用皮质类固醇密切相关，导致骨细胞凋亡和股骨头结构完整性丧失，并破坏骨血管组织[1-2]。压电通道蛋白1(Piezoelectric channel protein 1，Piezo1)是骨骼发育和成骨细胞分化所需的关键生物力传感器之一，其功能的发挥与Yes相关蛋白1(Yes associated protein 1，Yap1)密切相关[3]。Piezo1缺失可抑制成骨细胞分化，还改善在发育过程中的骨骼损失，因为Piezo1激活可诱导Yap1和转录因子β-连环蛋白(β-catenin)的表达并活化Yap1/β-catenin信号[4]。然而，Piezo1在皮质类固醇诱导ONFH中的表达情况及对骨细胞凋亡和血管生成的调节作用并不明确。

本研究通过类固醇诱导ONFH动物模型，研究沉默Piezo1对ONFH发生的影响并探讨其机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物和分组处理

48只成年雄性Wistar大鼠(12周龄)购于广州中医药大学实验动物中心。 每只动物饲养环境为55 cm×35 cm×26 cm的有机玻璃笼子中，光照/黑暗周期12 h/12 h，温度24～25 ℃，湿度50%～55%。动物自由采食饮水。所有实验方案均遵守美国国立卫生研究院出版的《实验动物的护理和使用指南》，并经本院动物研究伦理委员会批准。

经过完全随机法将所有大鼠分为4组，各12只。1)类固醇激素+siP1组(STE+siP1组)：在第1天用1.5 mL注射器于大鼠股骨远端松质骨富集处垂直骨面进针，髓腔注射siP1的体内转染复合物 50 μL，注射完2 h后和24 h后静脉注射1.8 mg/kg的LPS，并于第3，4，5，6，7天肌肉注射25 mg/kg甲基强的松龙，以促进股骨头坏死的发展，在第15天再次髓腔注射50 μL siP1体内转染复合物。2)类固醇激素+siNC组(STE+siNC组)：将髓腔注射的siP1替换为等量的siNC的体内转染复合物，其余步骤和1)一致。3)类……