刘志峰 陈永汉 姜 浩

胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）是恶性程度最高的颅内原发性肿瘤，目前主要行手术治疗联合化疗、放疗等综合治疗，但因肿瘤呈侵袭性生长，彻底切除难度大，术后易复发，预后很差。近年来，研究发现肿瘤组织多种基因呈异常表达[1]。研究发现血管动蛋白（angiomotin，AMOT）家族成员可能具有抑癌或致癌作用，类血管动蛋白-2（angiomotin like-2，AMOTL2）作为该家族的一员，参与肿瘤进展[2]。Takaoka 等[3]发现FK506 结合蛋白51（FK506 binding proteins 51，FKBP51）可通过调节RhoA 和ROCK 蛋白，对细胞运动进行控制，参与肿瘤细胞侵袭、迁移。本文探讨AMOTL2、FKBP51 表达水平与GBM病人预后的关系，为临床提供参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象 纳入标准：病理诊断证实为GBM；年龄≥18岁；首次就诊，之前无放、化疗等；临床资料完善；签署同意书。排除标准：患其他原发性肿瘤；因GBM 复发入院；患血液系统、自身免疫系统等疾病；入院前3个月内有大手术史；既往有精神障碍、脑血管疾病、脑膜炎等病史。

收集2016 年6 月～2019 年6 月手术切除的GBM标本92例，取同期收治的颅脑损伤内减压术切除的非肿瘤脑组织48 例为对照组。两组基线资料无统计学差异（P＞0.05，表1）。

表1 GBM组织AMOTL2、FKBP51、P53、EGFR的表达变化及IDH1突变情况（例）

1.2 检测方法 采用免疫组化法分析AMOTL2、FK⁃BP51 以及异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydroge⁃nase-1，IDH1）、P53、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）表达情况。组织行石蜡包埋，切片厚度为5 μm。60 ℃烘烤30 min，脱蜡至水化，PBS 洗涤3次×3 min。微波炉内热修复20 min修复抗原，PBS 洗涤3 次×3 min。3%去离子水孵育15 min，PBS 洗涤3 次×3 min。10%山羊血清室温反应15 min。加一抗，37 ℃反应2 h，4 ℃孵育过夜，PBS洗涤3 次×3 min。加二抗，37 ℃孵育30 min，PBS 洗涤3 次×3 min。加入辣根过氧化物酶，37 ℃反应15 min，PBS 洗涤3 次×3 min。DAB 显色后，苏木素复染，干燥、透明、封片，显微镜下观察。……