邱志超，李卓霏，石 宏，2

（1.昆明理工大学 灵长类转化医学研究院，云南 昆明 650500；2.国家卫计委西部孕前优生重点实验室，云南 昆明 650021）

1 基因编辑技术的发展及原理

1866年，Mendel发现遗传定律奠定了现代遗传学的发展，经过科学家150多年的不懈努力，以基因为核心的分子生物学技术已经深入治疗人类疾病的各个方向.根据欧洲罕见病组织近期的一份研究报告显示［1］：在全世界，超过3亿人患有6 000多种已确定罕见遗传病中的一种或多种，且不包括罕见病中其他非遗传性疾病的患者.1972年至2009年，基因治疗理论从首次被提出作为治疗人类遗传疾病的潜在方案［2］，到入选Science杂志2009年度十大科学进展之一［3］，其为包括罕见病在内的多种疾病治疗带来了新的解决方案.目前，基因治疗方案主要以病毒载体递送外源基因的方式治疗疾病，虽然取得了一定的进展，但由于某些不确定性因素会诱导机体对载体产生免疫应答反应，从而使得基因治疗方案一直存在潜在的其他致病风险.基因编辑技术的出现，为人类削弱这些潜在的致病风险提供了新的思路［4］.图1展示的为不同基因编辑技术发展的主要时间线.

图1 基因编辑的发展时间线Fig.1 Timeline of developments in genome editing

1.1 ZFNs技术

ZFNs由决定其特异性的锌指蛋白结构域和切割DNA的Fok I核酸酶结构域共同组成.1983年，Hanas等［5］通过对非洲爪蟾TFIIIA的研究，率先报道了7S核糖核蛋白中Zn的存在，且介导TFIIIA与5S基因内部控制区域的结合.在此基础上Miller等［6］发现，TFIIIA的5S RNA体外转录过程的正常进行，需要一……