miR-548t-3p靶向CITED2调控甲状腺癌细胞的凋亡研究
2021-11-02王爱霞刘玮芳王春平
王爱霞 刘玮芳 王春平
甲状腺癌(TC)是常见的内分泌恶性肿瘤,最近几十年来在世界范围内迅速增加[1]。根据2014年世界癌症报告,全球约有298,000例新的TC病例和40,000例死亡病例[2]。根据2015年的中国癌症统计资料,TC已成为中国女性中的第六位恶性肿瘤,也是30岁以下女性中最常见的肿瘤[3]。此外,TC的复发率很高,导致治愈率下降和死亡率显着增加,这严重危害了人类健康[4]。目前,最常见的TC治疗方法是手术结合放射疗法或化学疗法。但是,它对耐受性乳头状癌,未分化癌和髓样癌没有很好的疗效,并且在癌症复发和对人体的危害方面仍存在争议[5]。因此,探索TC的肿瘤发生机制,寻找影响TC细胞增殖和凋亡的关键分子,是TC治疗的重要途径。miRNA是一大类微小的非编码RNA,它们是内源编码的,并通过与靶mRNA的3'UTR区结合而负调控基因表达,从而导致mRNA的翻译抑制或降解[6]。Vriens等[7]通过高通量测序发现TC癌组织和TC癌旁组织中miRNA的表达种类显著不同,包括miR-548t-3p。然而,miR-548t-3p在TC细胞中的功能尚未得到研究。基于此,本研究旨在探讨miR-548t-3p调控甲状腺癌细胞凋亡的潜在机制。
1 材料与方法
1.1 材料
甲状腺癌细胞SW579、B-CPAP、8305C、BHT101、CAL-62、KHM-5M、TPC-1、FTC-133、HTh-7均购自普诺赛公司(货号:CL-0457,CL-0575,CL-0613,CL-0617,CL-0618,CL-0623,CL-0643,CL-0644,CL-0647)。miR-548t-3p mimcis,miR-548t-3p inhibitor,siRNA和过表达质粒均有北京擎科合成。lipo3000转染试剂购自武汉市武昌区科迈实验用品经营部(货号:L3000015)。TRIzol试剂购自四川爱奇生物科技有限公司(货号:15596026)。第一链cDNA合成试剂盒购自宝如亿(北京)生物技术有限公司(货号:N118-1-1)。BCA蛋白测定试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司(货号:P0012)。CITED2抗体购自广州吉英生物科技有限公司(货号:46505)。……
