去整合素金属蛋白酶15通过AKT/ERK通路和MMP9影响肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

2021-10-29周洁琦徐圣杰高莉蓉刘泽毅

临床肺科杂志 2021年11期

周洁琦徐圣杰高莉蓉刘泽毅

肺癌是导致癌症相关性死亡的主要原因[1]，肺癌的发病率和死亡率均位于全球首位[2]。尽管有针对非小细胞肺癌(NSCLC)的多种治疗方法，对于晚期患者疗效仍然有限，五年生存率仍然较低[3]。因此，迫切需进一步研究NSCLC的发病机理，并寻找有效的治疗方法。去整合素金属蛋白酶(ADAM)属于去整合素金属蛋白酶家族成员，包括信号肽，前肽，金属蛋白酶域，去整合素域等区域，在调节细胞与细胞和细胞与基质的相互作用中起到重要作用[4-5]。研究表明ADAM15在许多实体恶性肿瘤中表达上调，且ADAM15的高表达与肿瘤的发生和转移有关，提示ADAM15高表达的患者预后较差[4, 6]。因此，本研究旨在探讨ADAM15对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制，旨在为肺癌的治疗提供新的靶点。

资料与方法

一、组织样本

收集2016至2018年苏州大学附属第一医院呼吸与危重症医学科20对肺癌组织及相应的癌旁组织样本。所有患者术前均未经放化疗和介入等治疗。此研究经苏州大学附属第一医院伦理委员会批准[2016伦理(申报)批第157-1号], 并获得所有涉及此研究患者的知情同意。

二、实验试剂

Trizol、RT-PCR试剂盒及SYBR Green RT-PCR试剂盒(日本TaKaRa公司)；ADAM15引物(苏州金唯智科技有限公司)；Lipofectamine 2000转染试剂(赛默飞公司)；ADAM15干扰序列(苏州吉玛基因股份有限公司)；Cell counting kit-8(CCK8)试剂(碧云天公司)；RPMI-1640培养基(Hyclone公司)；胎牛血清(Gibco公司)；结晶紫染液(上海生工公司)；ADAM15抗体(Santa Cruz公司)、p-AKT、AKT、p-ERK、ERK、MMP2、MMP9抗体(CST公司)；β-actin抗体、山羊抗鼠IgG、山羊抗兔IgG(北京康为世纪生物科技有限公司)。