唐柳生 蒙志好 张明 廖光付 刘爱梅 黄丽玲

近年来，随着医学分子生物学技术的进步，分枝杆菌的菌种鉴定技术越来越成熟，有关分枝杆菌感染分布和感染危险因素的研究报道也越来越多。不同的地域，肺部分枝杆菌感染分布和感染危险因素亦有所不同[1]，为了解我院肺部感染分枝杆菌菌种分布和感染危险因素的状况，我们采用荧光 PCR 熔解曲线技术对2019年12月～2020年3月到我院住院的330例肺部感染分枝杆菌的临床分离株进行菌种鉴定，为临床快速诊断分枝杆菌病提供实验依据，现报道如下。

资料与方法

一、标本及病例来源

标本来源于2019年12月～2020年3月间我院330例住院的肺部分枝杆菌感染患者，其中男250例(83.3%)，女80例(16.7%)，年龄14～94岁，平均年龄53.3岁；农村户籍218例，城镇户籍112例；壮族167例，汉族145例，其他民族18例。

二、仪器及试剂

萋尼氏染色液及中性罗氏培养基由珠海贝索公司提供，Lab-Aid 824 核酸提取仪、SLAN 96S PCR 仪及菌种鉴定试剂由厦门致善公司提供。

三、诊断标准

分枝杆菌病诊断依据WS288-2017《结核病诊断标准》和《结核病分类标准》。

四、方法

1.用中和离心法对住院疑似肺结核患者的痰标本进行分枝杆菌培养，按《结核病诊断细菌学检验规程》进行操作[2]。

2.将分枝杆菌培养阳性菌株用萋尼氏染色法进行抗酸杆菌的确定，然后将确定为抗酸杆菌的菌株纳入研究组

3.将研究组的菌株用荧光 PCR 熔解曲线技术进行菌种鉴定。先用Lab-Aid 824 核酸提取仪进行核酸提取，然后用SLAN 96S PCR 仪进行扩增，实验运行完毕后，仪器将自动给出判读结果。……