截短型转化生长因子β II型受体对急性肝损伤小鼠炎症因子表达的影响
2021-10-28王小花初彦辉刘海峰
黄 珍,王小花,初彦辉,刘海峰
(牡丹江医学院 1.医药研究中心;2.基础医学院,黑龙江 牡丹江 157011)
肝脏是人体代谢的重要器官,具有储存肝糖和合成分泌性蛋白质等重要功能。四氯化碳(CCl4)可诱导急性肝损伤,诱发炎症并持续性损伤肝脏,进而发展为肝硬化等多种慢性肝脏疾病,最终造成肝脏功能紊乱[1-2]。因而,急性肝损伤是影响肝功能的主要因素[3-4],研发防治急性肝损伤的药物对于维持正常的肝功能具有重要意义。课题组前期研究表明:截断型的转化生长因子β II型受体(tTβRII)可通过有效抑制TGF-β1功能而缓解慢性肝损伤[5],但其对急性肝损伤炎症细胞因子的影响尚未见报道。因此,本研究以注射CCl4诱导的小鼠急性肝损伤动物为研究对象,探讨tTβRII对急性肝损伤炎症指标的影响,为急性肝损伤疾病的治疗提供实验基础和理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验试剂与仪器四氯化碳(美国Sigma公司);苏木素-伊红(HE)染色试剂盒(北京索莱宝公司);兔抗鼠的TNF-α和IL-1β一抗(美国Proteintech公司);羊抗兔的Ig G二抗(北京碧云天公司);DAB显色试剂盒(北京金杉公司);RNA抽提试剂盒(美国Omega公司);逆转录试剂盒SYBR Green Master(美国Roche公司);TNF-α和IL-1β PCR引物(苏州金唯智公司);重组tTβRII由本实验室制备;荧光定量PCR仪(美国ABI公司)和光学显微镜(日本Olympus公司)。
1.2 方法
1.2.1 急性肝损伤动物模型的制备和处理 SPF级C57BL/6J小鼠,雄性,体重18~22 g,由牡丹江医学院动物中心提供,动物合格证号:SCXK(黑)2019-003,饲养期间动物自由进食饮水,动物房光照节律12 h:12 h,适应1周后开始实验。将20只小鼠随机分为4组,随机分为空白对照组(control)、模型组(CCl4)、模型对照组(CCl4+PBS)和tTβRII处理组(CCl4+tTβRII),每组5只。……
