葛亮 ，苟庆云，赵金凤 ，张聪，陈灵芝 ，胡晓丽 ，詹江华

胆道闭锁（biliary atresia，BA）是婴儿期严重的肝胆系统疾病，以肝内、外胆管进行性炎症和纤维性梗阻为特征，继而导致胆汁淤积、肝纤维化和肝硬化。国内外研究表明进行性肝纤维化是影响肝门-空肠吻合术（Kasai 手术）预后的关键因素［1-3］。如何有效阻断肝纤维化进展是目前亟需解决的问题。研究表明转化生长因子β（TGF-β）/SMAD 信号通路在BA 肝纤维化中发挥了重要作用［4］。骨形态发生蛋白 9（bone morphogenetic protein 9，BMP-9）属 于TGF-β超家族成员，参与调节多种生物功能，包括铁离子平衡、软骨形成、血管生成、神经元分化及脂质代谢等。此外，研究表明BMP-9具有促进肝纤维化的作用［5］。但 BMP-9 在 BA 肝组织中的表达情况尚不明确。本研究检测了BMP-9 及其下游通路蛋白/基因在BA肝组织中的表达情况，并通过细胞实验探讨其促进纤维化进程的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料 采用简单随机法抽取天津市儿童医院2018 年1 月—2019 年 1 月收治的 14 例 BA 患儿 Kasai 手术时肝组织标本为 BA 组，其中男 6 例，女 8 例，手术日龄 40～82 d，平均（67±11）d。BA 诊断标准：手术探查及术中胆道造影确诊为Ⅲ型胆道闭锁。简单随机法抽取同期5 例胆总管囊肿（congenital biliary dilatation，CBD）患儿手术时肝组织标本为CBD组，其中男2例，女3例，手术日龄287～752 d，平均（479±181）d。CBD 诊断标准：术前根据腹部超声及磁共振检查确诊。肝组织标本均取自术中肝右叶前缘组织，10%福尔马林溶液固定，用于HE、免疫组织化学染色；部分新鲜肝组织获取后放置无菌EP 管中，-80 ℃冰箱内保存，用于实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）检测。LX-2 人肝星状细胞（341818）购自BNCC 公司。……