李 建，温伯泉，郭士兵，王 岩

(1.开滦总医院林西医院麻醉科，河北 唐山 063100；2.唐山市中心医院麻醉科，河北 唐山 063000)

骨折创伤部位局部免疫细胞会增加并分泌白细胞介素(IL)17等细胞因子，参与骨组织形成，增加成骨细胞的活性，促进骨折部位愈合[1]。辛伐他汀的主要功能是抑制内源性胆固醇的合成，从而起到降低血脂的作用，在临床上主要被用于治疗高胆固醇血症和冠心病等，其也可以显著促进骨质疏松引起的骨折愈合[2]。本研究将通过不同剂量辛伐他汀干预大鼠肋骨骨折模型，探讨不同剂量辛伐他汀对大鼠骨折后不同时间免疫细胞及炎症因子释放的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器：FACS Calibur型流式细胞仪(美国BD公司)；4 ℃冰箱(合肥美菱股份有限公司)；SC-3610型低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)；pectraMax190型酶标仪(美国MD公司)；一次性使用微量采血管(20 μl，泰州市宇杰医疗器械有限公司)。

1.1.2 药品与试剂：乙醚购自天津市申泰化学试剂有限公司；辛伐他汀(S6196，5 mg)购于美国Sigma公司；Rat 肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒(RAB0479)和Rat IL-17 ELISA试剂盒(RAB1906)购于美国Sigma公司；PE Anti-CD8(ab95526，50 μl)和APC Anti-CD4(ab256309，100 μl)购于美国Abcam公司。

1.1.3 实验动物：8～10周龄雄性SPF级SD大鼠，由北京维通利华实验动物中心提供。

1.2 方法

1.2.1 大鼠肋骨骨折模型的建立：60只8～10周龄雄性SD大鼠于SPF级鼠房饲养，室温调节在(25±2)℃，相对湿度为40%～65%，12 h/12 h昼夜交替照明，自由摄取食物和饮用水。适应性饲养1周后，将大鼠随机分为三组，即对照组和辛伐他汀低、高剂量组(5、10 mg/kg)，每组20只[3]。以10%水合氯醛腹腔注射大鼠麻醉，大鼠取俯卧位，常规剪毛后碘伏消毒，铺无菌巾，沿肋骨走形作斜行切口(长约1 cm)切开背部皮肤，肌肉，暴露第6肋骨，锐性剥离肋间肌肉，距脊柱约1.5 cm处用眼科剪剪断，复位，分层缝合。……